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更新時間:2017-07-06 09:33:59瀏覽次數(shù):180次
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福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
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乳酸脫氫酶染色試劑盒(M4型,LDH5)2×50ml使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
乳酸脫氫酶染色試劑盒(M4型,LDH5)2×50ml使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
MGC80-3(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;Jurkat, Clone E6-1
VEGFA Others Canine 狗 VEGF / VEGFA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
H7402細(xì)胞,人肝癌細(xì)胞 小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞,EAC細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO-76
*/*溶液P/S
Promocell C-23061 Skeletal Muscle CellDifferentiation Medium, 骨骼肌細(xì)胞分化培養(yǎng)基(即用型) 500ml
豹貓肌肉成纖維樣細(xì)胞;LCM4
IFNA13 Others Mouse 小鼠 IFNA13 / Interferon alpha-13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
JEG-3 人絨毛膜癌細(xì)胞
WPMY-1人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞 WPMY-1 of normal human prostate stromal immortalized cell DMEM+5%FBS
VEGFC Protein Human 重組人 VEGF-C 蛋白 (His 標(biāo)簽)
小鼠條紋神經(jīng)細(xì)胞(MN-s)(1×106) 5-8F, 人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞系 Human
PON3 Others Human 人 PON3 / Paraoxonase 3 (50 Ser/Asn) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-BE1
CM-R046大鼠腸上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
RL95-2, 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系 羊膜細(xì)胞,H.A.細(xì)胞 WERI-Rb-1(人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤)
小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16
GP1BB Others Human 人 GP1Bβ / CD42c 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠含IQ基元GTP酶激活蛋白1(IQGAP1)ELISA試劑盒 ,英文名: IQGAP1 ELISA Kit
人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA檢測試劑盒Humanthymus-leukemiaantigen,TLaELISAKit 96T/48T
大鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)免疫試劑盒 Rat Glycogen phosphorylase MM,GP-MM ELISA Kit
英文名稱RatMBPELISAKit大鼠髓磷脂堿蛋白(MBP)規(guī)格:96T/48T
化妝品氨熒光定量檢測試劑盒20次
ELISAKitACE人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶規(guī)格:48T/96T
小鼠膀胱抗原(BTA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat noradrenaline (NA) ELISA Kit 大鼠*(NA)ELISA試劑盒
Humanurokinase-typeplasminogenactivator,uPA/PLAUELISAKit 人*型纖溶酶原激活物(uPA/PLAU)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanbreastcancersusceptibilityprotein2,BRCA-2ELISA試劑盒人癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物組織線粒體超氧化物歧化酶(Mn/FeSOD)分離試劑盒50次
Humansorbitoldehydrogenase,SDHELISAKit人*脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乳酸脫氫酶染色試劑盒(M4型,LDH5)2×50ml使用說明書人血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血紅蛋白β亞基(HB-β)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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