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更新時間:2017-07-06 09:33:27瀏覽次數(shù):155次
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福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
乳酸脫氫酶染色試劑盒2×50ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
乳酸脫氫酶染色試劑盒2×50ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
乳酸脫氫酶染色試劑盒2×50ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
MFC(小鼠胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2
人結(jié)直腸腺癌細胞;HCT-8 [HRT-18]
ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細胞裂解液 (陽性對照)
Hep-3B細胞,人肝癌細胞系 小鼠肺癌細胞,LLC細胞 大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-6
細胞衰老檢測試劑盒CSA
Promocell C-23025 Fibroblast Growth Medium 3, 成纖維細胞生長培養(yǎng)基3型(即用型) 500ml
豚鼠皮膚細胞;GP-S2
IFNA14 Others Mouse 小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0093HCC1937(人癌細胞)5×106cells/瓶×2
HL細胞,*系 人組織細胞淋巴瘤細胞,U937細胞 小鼠B細胞雜交瘤細胞;W6/32
BEL-7402(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CTSD Others Mouse 小鼠 Cathepsin D / CTSD 人細胞裂解液 (陽性對照)
IFNA13 Others Mouse 小鼠 IFNA13 / Interferon alpha-13 人細胞裂解液 (陽性對照)
人肺巨細胞癌低轉(zhuǎn)移細胞株;PG-LH7
MM, 小鼠小膠質(zhì)細胞
MDA-MB-157細胞,癌細胞 人胎盤絨膜癌細胞,BeWo細胞 人肺動脈內(nèi)皮細胞RNAHPASMC miRNA5 μg
恒河猴腎細胞;MMK2
EPHB6 Others Human 人 EphB6 / EPHB6 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胸腺表達趨化因子(TECK/CCL25)免疫試劑盒 Human TECK ELISA Kit
蘋果酸脫氫酶(MDH)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
Ratluteotropichormone,LHELISA試劑盒大鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humangrowth-regulatedoncogeneβ/melanomagrowthstimulatingactivity,GROβ/MGSAELISA試劑盒人生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLeptin,LEPELISAKit人瘦素(LEP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠交聯(lián)物(PY)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human ferritin (FE) ELISA Kit 人鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒
Humanreceptortyrosinekinase,RTKsELISAKit 人受體*激酶(RTKs)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanBreastandkidneyexpressedchemokine,BRAKELISA試劑盒人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物組織細胞核粗提分離試劑盒20次
Humansphingomyelin,SMELISAKit人鞘磷脂(SM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乳酸脫氫酶染色試劑盒2×50ml實驗方法人血栓海綿蛋白(TSP)ELISA試劑盒 96T/48 試劑盒 組裝/原裝
人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血清總補體(CH50)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血清一氧化氮(NO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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