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更新時(shí)間:2017-07-06 09:31:27瀏覽次數(shù):254次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)細(xì)胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實(shí)驗(yàn)方法
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人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;C918
CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
HuH-7細(xì)胞,人肝癌細(xì)胞 小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞,P388D1細(xì)胞 小型豬腎細(xì)胞;MPK
人雪旺細(xì)胞裂解物HSCL
Promocell C-22121 Endothelial Cell GrowthMedium MV 2 KIT, 內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基MV2套裝 500ml
ATPase染色試劑盒(鈣鈷法)5×50ml免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
ATPase染色試劑盒(鈣鈷法)5×50ml免費(fèi)代測(cè)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
ATPase染色試劑盒(鈣鈷法)5×50ml免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
CM-H105人皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
IFNA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人支氣管平滑肌細(xì)胞HBSMC
RWPE1細(xì)胞,人前列腺上皮細(xì)胞 鼬肺上皮細(xì)胞,MV-1-Lu細(xì)胞 小鼠海馬趾神經(jīng)元MN-h
LA795(小鼠肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Acc-2(人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R035大鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 人胚腎上皮細(xì)胞系;KiMA
ERBB3 Others Rat 大鼠 HER3 / ErbB3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞cDNAHPASMC cDNA
人破骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
PA317細(xì)胞,小鼠胚成纖維包裝細(xì)胞 6T-CEM(T細(xì)胞白血病) 大鼠腎小球系膜細(xì)胞;HBZY-1
EFNB1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
A-427(人肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠T淋巴細(xì)胞;Cl.Ly1+2-/9
大鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒 ,英文名: NSE ELISA Kit
人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanthymidinephosphorylase,TPELISAKit 96T/48T
鵝降鈣素(CT)免疫試劑盒 Goose Calcitonin,CT ELISA Kit
CLIAKitforPlantVitaminD,VDELISAKit植物維生素D規(guī)格:48T/96T
石蠟切片組織鈣ATP酶SERCA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次
ELISAKitHDVIgG人丁型肝炎IgG規(guī)格:48T/96T
小鼠酸激酶(PK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat hydrocortisone (HYD) ELISA Kit 大鼠輕化可的松(HYD)ELISA試劑盒
HumanHexokinase,HKELISAKit 人己糖激酶(HK)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISA試劑盒人骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物組織可溶性總蛋白制備試劑盒20次
HumanSS-B/LaAntibody,ELISAKit人抗SS-B/La抗體ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
ATPase染色試劑盒(鈣鈷法)5×50ml免費(fèi)代測(cè)人血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血小板衍生生長(zhǎng)因子AA(PDGF-AA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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