淀粉樣物質(zhì)染色試劑盒(甲紫法)2×50ml免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
淀粉樣物質(zhì)染色試劑盒(甲紫法)2×50ml免費(fèi)代測(cè)操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
淀粉樣物質(zhì)染色試劑盒(甲紫法)2×50ml免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
LoVo(人大腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

小鼠淋巴瘤細(xì)胞;EL4

IL2RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL2RA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

LX-2細(xì)胞，人肝星形細(xì)胞正常 人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞,HFSF細(xì)胞 家貓肺細(xì)胞;FCA-L2

人顱骨造骨細(xì)胞裂解物HCOL

Promocell C-21110 Mammary Epithelial Cell GrowthMedium KIT, 上皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基套裝 500ml
人前列腺上皮細(xì)胞HPEpiC

IFNA5 Others Mouse 小鼠 IFNA5 / IFNaG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

牦牛皮膚細(xì)胞;BMU-S1

大鼠癌細(xì)胞;MADB106 胃腺癌細(xì)胞，AGS細(xì)胞 SDBMSC細(xì)胞，SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞

U266B1 [U266], 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 Human

TNFRSF1A Others Mouse 小鼠 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
HA Others H10N3 甲型流感 H10N3 (A/mallard/Minnesota/Sg-00194/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞HPAF

豬小腸上皮細(xì)胞;ZYM-DIEC02

黑化大家鼠肺成纖維細(xì)胞;NRm 管癌細(xì)胞，BT549細(xì)胞 MA-782細(xì)胞，鼠癌細(xì)胞系

GH3, 大鼠垂體生長(zhǎng)激素腺瘤 Rattus

EDAR Others Human 人 EDAR / DL 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人*(TP-5)免疫試劑盒 Human Thymopentin,TP-5 ELISA Kit

軍團(tuán)菌抗體IgM(LP Ab-IgM)ELISA試劑盒 ，英文名： LP Ab-IgM ELISA Kit

Ratlipoproteinα,Lp-αELISA試劑盒大鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humangrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISA試劑盒人促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanLegionellaantibodyIgG，LPAb-IgGELISAKit人軍團(tuán)菌抗體IgG(LPAb-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
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Human glycogen phosphorylase BB (GP-BB) ELISA Kit 人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒

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