當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞染色>> 淀粉樣物質(zhì)染色試劑盒(Puchtler堿性剛果紅法)4×50ml售后服務(wù)
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更新時間:2017-07-06 09:28:31瀏覽次數(shù):121次
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淀粉樣物質(zhì)染色試劑盒(Puchtler堿性剛果紅法)4×50ml售后服務(wù)使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
淀粉樣物質(zhì)染色試劑盒(Puchtler堿性剛果紅法)4×50ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
淀粉樣物質(zhì)染色試劑盒(Puchtler堿性剛果紅法)4×50ml售后服務(wù)實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞;MFC-GFP
CD86 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD86 / B7-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
HL-7702細(xì)胞,人肝細(xì)胞正常 人干細(xì)胞因子單克隆抗體細(xì)胞株,AMS2細(xì)胞 敘利亞倉鼠皮膚細(xì)胞;GH-S1
人角膜細(xì)胞裂解物HKL
Promocell C-20011 Keratinocyte GrowthMedium 2, 角質(zhì)細(xì)胞生長培養(yǎng)基2型(即用型) 500ml
雜交瘤(B類);C3110D2E11
IFNA5 Others Rat 大鼠 IFNA5 / IFNaG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人前列腺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
Calu-6細(xì)胞,人退行性癌細(xì)胞 克雷伯肺炎桿菌 敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21
CXCL12 Protein Canine 重組狗 CXCL12 / SDF-1 蛋白
NCI-H1299(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CXADR Others Human 人 CXADR / CAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人肺成纖維細(xì)胞裂解物HPFL
BNL CL.2 小鼠胚胎肝細(xì)胞
CL-0134KU812(人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人絨毛膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞
人胚腎細(xì)胞;293 Cells, low passage 人心室肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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Ratlipoproteinlipase,LPLELISA試劑盒大鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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HumanLegionellaantibodyIgA,LPAb-IgAELISAKit人軍團(tuán)菌抗體IgA(LPAb-IgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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Rat prostaglandin F2 alpha (PGF2 alpha) ELISA Kit 大鼠前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒
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