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更新時間:2017-07-06 09:26:16瀏覽次數(shù):249次
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福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
真菌糖原PAS染色試劑盒3×20ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
真菌糖原PAS染色試劑盒3×20ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
真菌糖原PAS染色試劑盒3×20ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維 5×106cells/瓶×2
小鼠黑色素瘤細胞;B16-F1
CSF2 Others Mouse 小鼠 GM-CSF / CSF2 人細胞裂解液 (陽性對照)
Hep3B2.1-7細胞,人肝癌細胞 人髓母細胞瘤細胞,D341Med細胞 中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24
人海馬趾星形膠質(zhì)細胞cDNAHA-h cDNA
Promocell C-28014 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Diff. Medium w/o, 間充質(zhì)干細胞軟骨分化培養(yǎng)基無誘導劑(即用型) 100ml
人生發(fā)基質(zhì)細胞HHGMC
IFNA8 Others Human 人 Interferon alpha-B / IFNA8 人細胞裂解液 (陽性對照)
大耳山羊腎細胞;LDG-2
A549/DDP細胞,耐DDP肺癌細胞 中國倉鼠肺細胞,CHL細胞 CM-M002小鼠肺血管平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
S-180(小鼠肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
Gibco 10639011 STEM PRO-34- COMBO 500ml
人卵巢上皮細胞(HOSEpiC) ( 5×105 )
人肺癌細胞;A-427 [A427]
CM-R056大鼠腎實質(zhì)細胞*培養(yǎng)基100mL
倉鼠/小鼠雜交瘤細胞;145-2C11 小鼠腸靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
MSC, 小鼠雪旺細胞 Mouse
NEGR1 Others Mouse 小鼠 NEGR1 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒 ,英文名: 8-OHdG ELISA Kit
人雄(ASD)ELISA檢測試劑盒HumanAndrostenedione,ASDELISAKit 96T/48T
大鼠多巴胺D2受體(D2R)免疫試劑盒 Rat dopamine D2 receptor,D2R ELISA Kit
CLIAKitforTTN(HumanAnti-titinAntibody)ELISAKit人抗肌聯(lián)蛋白抗體規(guī)格:48T/96T
牛奶維生素A含量熒光定量檢測試劑盒20次
ELISAKitsFAS/Apo-1人可溶性凋亡相關因子規(guī)格:48T/96T
小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human glucocorticoid receptor alpha (GR- alpha) ELISA Kit 人糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA試劑盒
Humanproteolipidprotein,PLPELISAKit 人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanBH3interactingdomaindeathagonist,BidELISA試劑盒人BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物總RNA純化試劑盒(高多糖/酚)20次
HumanSurfaceMembraneImmunoglobulin,SmIgELISAKit人細胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌糖原PAS染色試劑盒3×20ml實驗方法人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抑制素(INH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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