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瑞氏-姬姆薩復(fù)合染色液2X100ml使用說(shuō)明書

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更新時(shí)間:2017-07-06 09:21:43瀏覽次數(shù):208次

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瑞氏-姬姆薩復(fù)合染色液2X100ml使用說(shuō)明書注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
瑞氏-姬姆薩復(fù)合染色液2X100ml使用說(shuō)明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
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IBRS-2(豬腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WML6.0

ACVRL1 Others Canine ALK1 / ACVRL1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

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大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-1

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HEC-1-B人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞 HEC-1-B human endometrial adenocarcinoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS

LGALS1 Protein Rat 重組大鼠 Galectin-1 / LGALS1 蛋白

小鼠心肌細(xì)胞(MCM)(1×106) QGY-7701, 人肝癌細(xì)胞 Human
CSF2 Others Human GM-CSF / CSF2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素素瘤細(xì)胞;OCM-1A

CoC2(懸浮) 卵巢癌

COLO 205人結(jié)腸癌細(xì)胞 COLO 205 human colon cancer cells 1640+10% FBS

TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白

人角膜成纖維細(xì)胞 (HcorF)( 5×105 ) EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細(xì)胞 Rattus
大鼠粘蛋白3(MUC3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血管緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-R)免疫試劑盒 Human angiotension I receptor Antibody,ANG-R antibody ELISA Kit

人抗Sa抗體(anti-Sa-Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: anti-Sa-Ab ELISA Kit

RatLeptinreceptor,LR/Ob-RELISA試劑盒大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanGlypican-3,GPC-3ELISA試劑盒人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humankillercelllectin-likereceptor,KLRELISAKit人殺傷細(xì)胞凝集素樣受體(KLR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠促性腺素釋放素受體(GnRHR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat coagulation factor IX (FIX) ELISA Kit 大鼠*IX(FIX)ELISA試劑盒

HumanComplementfragment4a,C4aELISAKit 人過(guò)敏毒素/補(bǔ)體片斷4(C4a)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanbasicfibroblastgrowthfactor9,bFGF-9ELISA試劑盒人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物直鏈淀粉比色法定量檢測(cè)試劑盒20

Humanterminaldeoxynucleotidyltransferase,TdISAKit人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
瑞氏-姬姆薩復(fù)合染色液2X100ml使用說(shuō)明書人壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE/ADAM17)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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