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更新時(shí)間:2017-07-06 09:20:30瀏覽次數(shù):121次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)細(xì)胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實(shí)驗(yàn)方法
細(xì)胞膜染色試劑 CM-Dil 200ul免費(fèi)代測(cè)
福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實(shí)驗(yàn)方法
改良Gram-Weigert*(苯胺結(jié)晶紫法)5X50ml免費(fèi)代測(cè)HuH-7(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS3
CDH8 Others Rat 大鼠 Cadherin-8 / CDH8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
JF-305細(xì)胞,人胰腺癌細(xì)胞 人皮膚癌細(xì)胞系,HS-1細(xì)胞 KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株;G422
人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞總RNAHPAF tRNA
Promocell C-22011 Endothelial Cell GrowthMedium 2, 內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基2型(即用) 500ml
改良Gram-Weigert*(苯胺結(jié)晶紫法)5X50ml免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
改良Gram-Weigert*(苯胺結(jié)晶紫法)5X50ml免費(fèi)代測(cè)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
改良Gram-Weigert*(苯胺結(jié)晶紫法)5X50ml免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
人角膜細(xì)胞HK
IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2
NCI-H838細(xì)胞,人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 大鼠正常肝細(xì)胞,BRL-3A細(xì)胞 CM-R055大鼠卵巢成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
RBL-2H3(大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-28055 M1-Macrophage GenerationMedium DXF, M1-巨噬細(xì)胞生成培養(yǎng)基DXF 250ml
PPP3CA Others Human 人 PPP3CA / 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人成骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2
CL-0429Romas(人淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人絨毛膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞 人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-ESF-1細(xì)胞 Sol8(小鼠骨骼肌肌肉母細(xì)胞)
人細(xì)胞;Hela S3 [HeLaS3]
ICAM1 Others Mouse 小鼠 ICAM-1 / CD54 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒 ,英文名: PTH ELISA Kit
人血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit 96T/48T
豬腦心肌炎病毒(EMCV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMV(Humanmorbillivirus)ELISAKit人麻疹病毒規(guī)格:48T/96T
體液超氧化物陰離子比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitCRP人C反應(yīng)蛋白規(guī)格:48T/96T
小鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat coagulation factor XIII (F XIII) ELISA Kit 大鼠*ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試劑盒
HumanGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit 人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanbasicfetoprotein,BFPELISA試劑盒人堿性胎兒蛋白(BFP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物脂肪酸合成酶(fattyacidsynthase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
HumanTetanusAntibodyELISAKit人破傷風(fēng)抗體(TetanusAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
改良Gram-Weigert*(苯胺結(jié)晶紫法)5X50ml免費(fèi)代測(cè)人周期素依賴性激酶5(CDK-5)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人周期素依賴性激酶2(CDK-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人重組激活基因2(RAG-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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