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更新時間:2017-07-06 09:20:00瀏覽次數(shù):207次
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福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
改良Masson染色試劑盒400ml使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
改良Masson染色試劑盒400ml使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
改良Masson染色試劑盒400ml使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
HuH-6(人肝母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6
EDA2R Others Cynomolgus 食蟹猴 XEDAR / EDA2R 人細胞裂解液 (陽性對照)
MIApaca-2細胞,人胰腺癌細胞 人成纖維肉瘤細胞,HT1080細胞 615小鼠肺癌瘤株;HP615
人骨骼肌細胞總RNAHSkMC tRNA
Promocell C-22010 Endothelial Cell Growth Medium, 內(nèi)皮細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml
人腎小球內(nèi)皮細胞cDNAHRGEC cDNA
IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細胞裂解液 (陽性對照)
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1
QGY-7701細胞,人肝癌細胞 人羊膜細胞,HA細胞 大鼠癌細胞;SHZ-88
KG-1(人急性骨髓性白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-25215 Hepatocyte Basal Medium (prf), 肝細胞基礎培養(yǎng)基,無酚紅 500ml
IL12A&IL27B Others Human 人 IL12A & IL27B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照)
人成骨肉瘤細胞;MG-63
人臍帶血單個核細胞
CTLL-2細胞,小鼠T細胞 人前列腺癌細胞,9L-B細胞 人絨毛間葉成纖維細胞RNAHVMF miRNA5 μg
恒河猴皮膚細胞;RM-S1
EPHB2 Others Human 人 EphB2 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒 Human angiotensin Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit
人抗sp100抗體(sp100)ELISA試劑盒 ,英文名: sp100 ELISA Kit
RatLactoferrin,LTF/LFELISA試劑盒大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanglycosaminoglycan,GAGELISA試劑盒人糖胺聚糖(GAG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanKeratinocyteGrowthFactor,KGFELISAKit人角化細胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠單胺氧化酶A(MAOA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human peptidoglycan (PG) ELISA Kit 人肽聚糖(PG)ELISA試劑盒
HumanGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit 人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanbactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPIELISA試劑盒人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物支鏈淀粉比色法定量檢測試劑盒20次
HumanTGF-beta-inducibleearlyresponsegene-1,TIEG1ELISAKit人TGF-β誘導早期基因1(TIEG1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
改良Masson染色試劑盒400ml使用說明書人轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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