細(xì)胞微絲染色試劑盒BBcellProbe M21 500T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
細(xì)胞微絲染色試劑盒BBcellProbe M21 500T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
細(xì)胞微絲染色試劑盒BBcellProbe M21 500T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
HO-8910(人卵巢癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

狗腎細(xì)胞隆突型;MDCK superdome

IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

PANC-1細(xì)胞，人胰腺癌細(xì)胞 人橫紋癌細(xì)胞,A673細(xì)胞 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;MEF

人成纖維細(xì)胞總RNAHMF tRNA

Cellgro 25-072-CI Lymphocyte Separation Medium(*) 100ml
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞RNAHUVEC miRNA5 μg

IFNW1 Others Human 人 IFN omega 1 / IFNW1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人腎足突細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

PC12細(xì)胞，大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 Hep G2(肝癌細(xì)胞) 人低分化肺腺癌細(xì)胞;GLC-82 [GLC82]

IL8 Protein Human 重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77)

SPC-A-1(人肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 FSTL1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
SIRPA Others Rat 大鼠 SIRP alpha / CD172a 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人腸平滑肌細(xì)胞cDNAHISMC cDNA

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B4

Bel-7402細(xì)胞，人肝癌細(xì)胞 人胚纖維細(xì)胞系,HEF細(xì)胞 大鼠纖維母細(xì)胞;1/EJ 1-1

KU812(人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

Promocell C-28011 Mesenchymal Stem CellAdipogenic Different. Medium, 間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化培養(yǎng)基(即用型) 100ml
大鼠組織因子前體(TF)ELISA試劑盒 ，英文名： TF ELISA Kit

人血管緊張素原(aGT)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanangiotensinogen,aGISAKit 96T/48T

大鼠彈力蛋白酶免疫試劑盒 Rat Elastase ELISA Kit

CLIAKitforTRH(Humangrowthhormonereleasinghormone)ELISAKit人促甲狀腺素釋放激素規(guī)格：48T/96T

葡萄糖一6一磷酸脫氫酶(G6PD)定量檢測(cè)試劑盒50次

ELISAKitApoA1人抗載脂蛋白抗體A1規(guī)格：48T/96T
小鼠*(CH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human placental lactogen (PL) ELISA Kit 人胎盤(pán)泌乳素(PL)ELISA試劑盒

Humanthrombin-antithrombincomplex,TAISAKit 人*抗*復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanazurocidin,AZUELISA試劑盒人天青殺素(AZU)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物源性飼料大豆基因檢測(cè)試劑盒20次

HumanThrombin，TMELISAKit人*(TM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
細(xì)胞微絲染色試劑盒BBcellProbe M21 500T實(shí)驗(yàn)方法人組織因子(TF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人組織型纖維溶酶激活物（t-PA）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因D（MICD）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝