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更新時(shí)間:2017-07-06 09:16:58瀏覽次數(shù):115次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)細(xì)胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實(shí)驗(yàn)方法
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細(xì)胞內(nèi)氯離子染色試劑盒500T免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
細(xì)胞內(nèi)氯離子染色試劑盒500T免費(fèi)代測(cè)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
細(xì)胞內(nèi)氯離子染色試劑盒500T免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
HMy2.CIR(人B淋巴母細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)
IL23 Others Marmoset 狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
HRC-99細(xì)胞,人直腸腺癌細(xì)胞系 人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞,C918細(xì)胞 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來(lái)自NIH3T3);PA12
人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞RNAHCPEC miRNA5 μg
ACVRL1 Others Human 人 ALK-1 / ACVRL1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
晶狀體上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
IGF2BP2 Others Human 人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人腎透明細(xì)胞癌;Caki-1
NK-92細(xì)胞,人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞系,Hep-3B細(xì)胞 CL-0184PANC-1(人胰腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24
SLAMF1 Others Human 人 CD150 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
ITGA5 & ITGB1 Others Human 人 ITGA5 & ITGB1 Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人表皮角質(zhì)細(xì)胞總RNAHEK tRNA
KYSE30 人食管癌細(xì)胞
CL-0320BC3H1(小鼠腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元
人胚胎心臟成纖維樣細(xì)胞;HEH2 人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠脂肪酸合成酶(FAS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管緊張素原(aGT)免疫試劑盒 Human aGT ELISA Kit
人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體(EBMZ)ELISA試劑盒 ,英文名: EBMZ ELISA Kit
Ratintestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISA試劑盒大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISA試劑盒人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanKallikrein1,KLK1ELISAKit人*1(KLK1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠*7α-羥化酶(CYP7A1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human placental alkaline phosphatase (PLAP) ELISA Kit 人胎盤堿性磷酸酶(PLAP)ELISA試劑盒
Humananti-thrombinreceptor,ATRELISAKit 人抗*受體(ATR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
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植物源性飼料處理試劑盒20次
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細(xì)胞內(nèi)氯離子染色試劑盒500T免費(fèi)代測(cè)山羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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