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更新時間:2017-07-06 09:16:27瀏覽次數(shù):134次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實驗方法
福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
高爾基體BBcellProbe G01綠色熒光染色試劑盒30T售后服務(wù)實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
高爾基體BBcellProbe G01綠色熒光染色試劑盒30T售后服務(wù)注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
HL-60(人早幼粒急性白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
家兔腎細胞;RABK3
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細胞裂解液 (陽性對照)
HIC細胞,人小腸癌細胞系 熒光素酶轉(zhuǎn)染人成骨肉瘤細胞,U2OS-Luc teT-on細胞 人結(jié)直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T]
人真皮微血管內(nèi)皮細胞RNAHDMEC miRNA5 μg
BACE1 Others Human 人 BACE1 / ASP2 人細胞裂解液 (陽性對照)
少突膠質(zhì)前體細胞培養(yǎng)基OPCM
IGFBP2 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP2 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠氣管和支氣管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠腎小球系膜細胞hbzy-1 Rat mesangial cell hbzy-1 DMEM(高糖)+10%FBS(或者EMEM+10%FBS)
NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 標簽)
NCI-H1975(人肺腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 神經(jīng)元細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
ACO1 Others Human 人 ACO1 / irp1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人表皮角質(zhì)細胞RNAHEK miRNA5 μg
兔間變表皮鱗癌瘤株;VX2
BxPC-3細胞,原位胰腺腺癌細胞 鼠骨髓瘤細胞,P3X63-Ag8.653細胞 人食管癌細胞;EC109
BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1
SELE Others Human 人 E-Selectin / CD62E 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)免疫試劑盒 Human Angiotensin converting enzyme 2,ACE2 ELISA Kit
人抗補體1q抗體(anti-C1q-antibody)ELISA試劑盒 ,英文名: anti-C1q-antibody ELISA Kit
RatInterleukin-7,IL-7ELISA試劑盒大鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISA試劑盒人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humankaliureticpeptide,KPELISAKit人利鉀尿肽(KP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠膽囊收縮素/腸促*肽(CCK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human placental ribonuclease inhibitor (HPRI) ELISA Kit 人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)ELISA試劑盒
Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit 人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanAttacin,AtISA試劑盒人抗菌肽(Att)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物源性食品榛果(hazelnut)基因檢測試劑盒20次
Humanthrombomodulin,TMELISAKit人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
高爾基體BBcellProbe G01綠色熒光染色試劑盒30T售后服務(wù)山羊腦啡肽(ENK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊內(nèi)啡肽(EP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊骨形成蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒 組裝/原裝
山羊孤啡肽(OFQ/N)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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