我司內(nèi)質(zhì)網(wǎng)BBcellProbe E01熒光染色試劑盒250T實(shí)驗(yàn)方法本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨，為客戶提供輕松便捷，安全可靠的網(wǎng)上采購模式！我們將竭誠為您服務(wù),咨詢！
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)BBcellProbe E01熒光染色試劑盒250T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細(xì)胞懸液每50～100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)BBcellProbe E01熒光染色試劑盒250T實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
HK-2(人腎小管上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

盤羊皮膚細(xì)胞;OAM-S1

CDH2 Others Human 人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

DLD-1細(xì)胞，人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤,Y79細(xì)胞 人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-30

人真皮成纖維細(xì)胞-新生兒RNAHEF-n miRNA5 μg

ACVR2B Others Human 人 ACVR2B / ActivinR-IIB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WD10

IGFBP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

MOLT-4細(xì)胞，人急性T淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞 大鼠卵巢癌細(xì)胞株,NUTU-19細(xì)胞 人外根殼細(xì)胞cDNAHHORSC cDNA

NCTC 1469(小鼠正常肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

COLO 205(人結(jié)腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0158MGC80-3(人胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠肝細(xì)胞;BRL
VIPR2 Others Human 人 VIPR2 / VPAC2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人表皮角質(zhì)細(xì)胞-胎兒HEK-f

兔眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;RYTF

中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1 腺癌細(xì)胞，SK-BR-3細(xì)胞 RK-13細(xì)胞，兔腎細(xì)胞系

SGC-7901, 人胃腺癌細(xì)胞系 Human

CPB2 Others Human 人 CPB2 / Carboxypeptidase-B2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠肌紅蛋白(MYO)ELISA試劑盒 ，英文名： MYO ELISA Kit

人血管緊張肽酶(Angiotensinase)ELISA檢測試劑盒HumanAngiotensinaseELISAKit 96T/48T

大鼠硒蛋白P(SEPP1)免疫試劑盒 Rat selenoprotein P, plasma, 1 (SEPP1)ELISA kit

英文名稱RatcardiactroponinIELISAKit大鼠心肌肌鈣蛋白I(cTNI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

海洋動物種系COI-5基因擴(kuò)增分析試劑盒20次

ELISAKitFbg人血纖蛋白原規(guī)格：48T/96T
小鼠膽囊收縮素8(CCK-8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat thrombin receptor (TR) ELISA Kit 大鼠*受體(TR)ELISA試劑盒

HumanN-terminalpro-brainnatriureticpeptide,NT-proBNPELISAKIT 人N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAtrialNatriureticPeptide,ANPELISA試劑盒人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物源性食品羽扇豆(lupine)基因檢測試劑盒20次

HumanThrombopoietin，TPOELISAKit人血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)BBcellProbe E01熒光染色試劑盒250T實(shí)驗(yàn)方法山羊壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

山羊胰島素樣生長因子1（IGF-1）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

山羊血小板衍化生長因子（PDGF）ELISA試劑盒         組裝/原裝

山羊生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝