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更新時間:2017-07-06 09:12:43瀏覽次數:202次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網細胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實驗方法
福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
線粒體超氧化物染色試劑盒BBcellProbe M1330T免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
線粒體超氧化物染色試劑盒BBcellProbe M1330T免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
HEp-2(人喉表皮樣癌細胞) 5×106cells/瓶×2
大額牛腎細胞;BFR-K1
SCN2B Others Human 人 SCN2B 人細胞裂解液 (陽性對照)
Hce-8693細胞,人盲腸腺癌細胞(未分化) 人視網膜母細胞瘤,Rb細胞 人Burkkit淋巴瘤細胞;Daudi
人前列腺平滑肌細胞RNAHPSMC miRNA5 μg
ACVR2A Others Human 人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 人細胞裂解液 (陽性對照)
人真皮成纖維細胞-新生兒裂解物HDF-n L
IGFBP6 Others Mouse 小鼠 IGFBP6 / IBP-6 人細胞裂解液 (陽性對照)
C2C12 小鼠成肌細胞
CL-0110HL-60(人早幼粒急性白血病細胞)5×106cells/瓶×2
人羊膜間充質基質細胞
人胚腎細胞(SV40T基因修飾);293T/17 人主動脈內皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
CD83 Others Rat 大鼠 CD83 人細胞裂解液 (陽性對照)
人表皮黑色素細胞-中色素裂解物HELM-m L
人腦成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
3T3-E1細胞,鼠胚成骨細胞 U937(組織細胞淋巴瘤) 山羊皮膚細胞;WGS1
EFNB2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標簽)
CW-2(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 表皮角化細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(sTRAIL)ELISA試劑盒 ,英文名: sTRAIL ELISA Kit
人血管內皮細胞生長因子(VEGF)ELISA檢測試劑盒HumanVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKIT 96T/48T
食蟹猴胰高血糖素(GC)免疫試劑盒 Cynomologus Monkey Glucagon,GC ELISA Kit
CLIAKitforOPNELISAKit大鼠骨橋素規(guī)格:48T/96T
糖果糖精(saccharin)含量紅外光譜法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitOrexinA人阿立新A規(guī)格:48T/96T
小鼠蛋白質二硫鍵異構酶(PDI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat urokinase type plasminogen activator receptor (PLAUR/uPAR) ELISA Kit 大鼠*型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒
Humananti-immunodeficiencyvirusantibody,HIVELISAKit 人抗人類免疫缺陷病毒抗體(HIV)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanasymmetricaldimethylarginine,ADMAELISA試劑盒人不對稱二甲基*(ADMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物源性食品土豆(potato)基因檢測試劑盒20次
Humanthymicstromallymphopoietin,TSLPELISAKit人胸腺基質淋巴細胞生成素(TSLP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
線粒體超氧化物染色試劑盒BBcellProbe M1330T免費代測兔骨橋素(OPN)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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