改良Harris*100ml免費(fèi)代測使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
改良Harris*100ml免費(fèi)代測操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
改良Harris*100ml免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
HEC-1-B(人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2

CDH2 Others Mouse 小鼠 N-Cadherin / CD325 / CDH2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

RKO-E6細(xì)胞，人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞 人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞,M619細(xì)胞 人耐VP16絨癌細(xì)胞株;JEG-3/VP16

人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞RNAHUMSC miRNA5 μg

ALPL Others Human 人 ALPL / TNAP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0042BxPC-3(人原位胰腺腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

IgG Others Human 人 IgG1 Fc CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

抗霉菌溶液ABAMS

大額牛肺細(xì)胞;BFR-L1 中國倉鼠卵巢細(xì)胞，CHO細(xì)胞 Lncap(前列腺癌細(xì)胞)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM933

SERPINE1 Others Human 人 PAI-1 / SerpinE1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
IFNG Others Ferret 雪貂 IFNG / Interferon Gamma 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人表皮黑色素細(xì)胞-深色素cDNAHEM-d cDNA

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)

Bel-7405細(xì)胞，人肝癌細(xì)胞 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝用的人胚胎成纖維細(xì)胞,PA317細(xì)胞 敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21

L6(大鼠成肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

Promocell C-28013 Mesenchymal Stem CellOsteogenic Different. Medium, 間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化培養(yǎng)基(即用型) 100ml
大鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒 ，英文名： sVCAM-1 ELISA Kit

人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D(VEGF-D)ELISA檢測試劑盒HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAKIT 96T/48T

*檢測試劑盒 Biotin ELISA Kit

CLIAKitforOPG(MouseOsteoprotegerin)ELISAKIT小鼠骨保護(hù)素規(guī)格：48T/96T

糖化血紅蛋白(HbA1c)比色法定量檢測試劑盒50次

ELISAKitPOMC人阿黑皮素原規(guī)格：48T/96T
小鼠抵抗素(Resistin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat Neuroglobin (NGB) ELISA Kit 大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒

humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISAKit 人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanarylsulfataseA,ASAELISA試劑盒人芳基酯酶A(ASA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物源性食品開心果(Pistachio)基因檢測試劑盒20次

HumanThymosinELISAKit人*(Thymosin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
改良Harris*100ml免費(fèi)代測兔*型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔*型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔內(nèi)皮素（Endothelin-1）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝