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Ca2+鈣離子染色試劑盒100T實驗方法

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更新時間:2017-07-03 14:46:55瀏覽次數(shù):202次

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Ca2+鈣離子染色試劑盒100T實驗方法公司供應(yīng)的細胞生物學試劑品種齊全,質(zhì)量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購!

Ca2+鈣離子染色試劑盒100T實驗方法儲存條件: -20℃避光保存。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡介:

鈣離子檢測試劑盒采用Fluo-3,AM細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光探針檢測鈣離子。Fluo-3,AM穿透細胞膜進入細胞后被細胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-3,從而被滯留在細胞內(nèi)。Fluo-3游離配體幾乎是非熒光性的,其熒光不會隨鈣離子濃度升高而增強。但是,當它與細胞內(nèi)鈣離子結(jié)合后可以產(chǎn)生較強的熒光,熒光會增加60100倍,大激發(fā)波長為506nm,大發(fā)射波長為526nm。實際檢測時*使用的激發(fā)波長為488nm左右,發(fā)射波長為525530nm??梢允褂脽晒怙@微鏡、酶標儀、激光共聚焦顯微鏡或流式細胞儀檢測細胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。

Ca2+鈣離子染色試劑盒100T實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
Ca2+鈣離子染色試劑盒100T實驗方法注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
白屈菜 Chelidonium majus L. Sanguinarine 血根堿 2447-54-3 C20H14NO4+ 98%

高三尖杉酯減HomohcrringtoninqHPLC98%,20mg/

茶減 Theophylline 58-55-9 20mg HPLC98% 用于含量測定

HPLC法含量測定鹽酸布替奈芬100681-200501常溫,避光100mg

Ibuprofen *標準品15687-27-1 750mg
160337-95-1 *標準品(NA) 15mg

高麗槐速;馬卡因GaoLihuai;maackiain19908-48-6HPLC98%,20mg/

LaMiide LAMIIDE 27856-54-8

噻嘧啶相關(guān)物質(zhì)A標準品25mg噻嘧啶相關(guān)物質(zhì)A標準品

5,6-二甲基呫噸酮-4-乙酸 117570-53-3 HPLC98%;20mg 訂購|咨詢
黃連堿 Coptisine (98%,HPLC) 3486-66-6 20MG 標準品

余甘子Phyllanthus emblica 算盤子二醇 6610-56-6 C30H50O2 97.5% 胡黃連苦甙 I168195

Sesamin芝麻素607-80-720mg/

Oxymetxolone CIII羥甲稀龍標準品434-07-1 200mg

長春花 Catharanthus roseus (L.)G.Don Catharanthine 長春質(zhì)堿 2468-21-5 C21H24N2O2 98%
莧菜紅1克保存:-20

阿脲;中草酸二酰脲;四氧嘧啶;二酰脲;1,3-二氮四羰六環(huán);2-氧代丙二酰脲;二氮-(1,3)六環(huán)四酮Alloxan;2,4,5,6-(1H,3H)PyriMi-dinetetrone;2,4,5,6-Tetraoxohexaxy7nopyriMidine;Mesoxalylurea;MesoxalylcarbaMide

4-甲基本酚,英文名或英文縮寫:p-Cresol,級別:BR,54-56℃,規(guī)格:500

甲硫醇鈉鹽 Sodium thiomethoxide,95% 5188-7-8 1G 通用試劑

L-天門冬安醋-β-芐酯(-20`C) L-cspcrtic ccid 4-bqnzyl qstqr 177-63-1
-4-磺酸shēng huà shì jì容量:1公斤

1433-27-81-叔丁基-4-1-TERT-BUTYL-3-etxylCARBODIIMIDE

轉(zhuǎn)移核糖核酸(酵母)shēng huà shì jì容量:25

苯銨 Ammonium benzoate,99.7% 1863-63-4 500G 通用試劑

Manganese II sulfate monohydrate (98... 10034-96-5 500G 通用試劑
Ca2+鈣離子染色試劑盒100T實驗方法*/鹽酸*/鹽酸*/鹽酸柔*/阿得里亞霉素/14-羥正定霉素/DOX USP級,98% 25、100、500毫克 國產(chǎn)/進口

RIBOZOLRNAEXTRACTIONREAGENTRiboZol RNA 抽提試劑生物技術(shù)級粉色至暗粉色透明液體RTsigma

(4-) POLY(4-VINYLPYRIDINq) 23-41-1

依來鉻藍R/藍光酸性鉻花青/羊毛鉻菁/媒介藍3/羊毛鉻花青R/3,3-(3H-2,1-苯并惡噻-3-亞基)(6-羥基-5-) S,S-二氧化物三鈉鹽/鉻花青R

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