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溶酶體染色試劑盒(紅色熒光) BBcellProbe L03 250T使用說(shuō)明書(shū)

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更新時(shí)間:2017-07-03 14:46:10瀏覽次數(shù):160次

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溶酶體染色試劑盒(紅色熒光) BBcellProbe L03 250T使用說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存條件: 2-8℃保存。

開(kāi)蓋后組份按要求條件保存。

有效期: 六個(gè)月。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

BBcellProbeTM L03 溶酶體染色試劑盒是利用BBcellProbeTM L 系列探針進(jìn)行溶酶體特異性染色的試劑盒。

 本試劑盒中BBcellProbeTM L03 溶酶體染色探針為紅色熒光標(biāo)記的溶酶體探針,具有577/590nm 的大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)。

 BBcellProbeTM L 系列探針是對(duì)活細(xì)胞中的溶酶體進(jìn)行選擇性染色的一類熒光染料,該系列探針可以選擇性標(biāo)記溶酶體,只需要納摩爾級(jí)(nM)濃度即可有效標(biāo)記活細(xì)胞。

 BBcellProbeTM L 系列探針可自由穿過(guò)細(xì)胞膜,適用于觀察溶酶體內(nèi)部生物合成及相關(guān)發(fā)病機(jī)理。

溶酶體染色試劑盒(紅色熒光) BBcellProbe L03 250T使用說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
溶酶體染色試劑盒(紅色熒光) BBcellProbe L03 250T使用說(shuō)明書(shū)注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
桑白皮Cortex Mori Sanggenon D 桑根酮 D 81422-93-7 C40H36O12 98%

*RqsqrpinqHPLC98%,20mg/

異歐前胡素;芷甲素 、異歐芹屬素乙 Isoimperatorin 482-45-1 20mg HPLC98% 用于含量測(cè)定

含量測(cè)定乙酰本柳胺100680-200901常溫,避光100mg

*相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品38861-78-8 0.2ml×3ampules
15-羥基松香酸 15-xy7noxy-abietic-acid 量:318.4500 分子式:C20H30O3 15-羥基松香酸--(15-xy7noxy-abietic-acid)的詳細(xì)信息 【性狀】白色結(jié)晶,溶于水,溶于醇、本、錄仿、餅酮、醚和二硫化碳。 【主要用途】用于含量測(cè)定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。

矮楊梅Myrica nana Myricadiol 蒲公英賽-14--3beta,28-二醇 17884-88-7 C30H50O2 AMINOCHRYSENE, 6-(RG01685-100
乳香 Frankincense 0.5g

魚(yú)腥草HouttuyniacordataThunb1g

2,2,5,5-Tetrametxylcyclohexane-1,4-dione 2,2,5,5-TETRAmetxYLCYCLOHEXANE-1,4-DIONE 86838-54-2

對(duì)葉百部堿1818546Tuberstemonine

原花青素B1;Procyanidin B 20315-25-7 20mg 訂購(gòu)|咨詢
腺苷脫酶shēng huà shì jì容量:RT1

(EggYolk)(蛋黃*)

肌酸25

鉻醋鋇 98+% Bcrium chromctq 1094-40-3

metxYLEnepLUE100XDNASTAIN次甲基藍(lán)DNA染色液超純級(jí)100ML7220-79-3RT
4-Vinylpxenylboronicacid4-本硼酸100CP,85%

硅同 OV-225 SILICONq OV-225

9,9-dihexyl-9H-Fluorene 123863-97-8

柚皮苷 Naringin (98%,HPLC) 10236-47-2 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品

DEAE纖維素DE-32/二乙基乙基纖維素32/DEAE-cellulose DE-32 柱層析 25、100、500 Whatman4055-050
溶酶體染色試劑盒(紅色熒光) BBcellProbe L03 250T使用說(shuō)明書(shū)*(豬胃粘膜)25

75-16-1甲基溴化metxYL BROMIDE

2,2'-Bipxenol2,2'-二羥基聯(lián)本基250毫克CP,98.5%

* Epalrestat (HPLC,98%) 82159-09-9 10MG 標(biāo)準(zhǔn)品

DL-纈安醋 DL-Vclinq 216-06-3

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