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線粒體紅色熒光染色試劑盒BBcellProbe M012000T使用說明書

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線粒體紅色熒光染色試劑盒BBcellProbe M012000T使用說明書儲(chǔ)存條件: 2-8°C保存。

試劑瓶開蓋后各組份按要求保存條件。

線粒體紅色熒光染色試劑盒BBcellProbe M012000T使用說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
線粒體紅色熒光染色試劑盒BBcellProbe M012000T使用說明書注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
紅根草Salvia prionitis Salvisyrianone none 250691-57-7 C20H24O3 95%

續(xù)隨二萜醇ContinuqdwiththqtwotqrpqnqclcoholsHPLC98%;20mg/

蒼術(shù)同 Atractylon 6989-21-5 20mg HPLC98% 用于含量測(cè)定

HPLC法含量測(cè)定左羥丙派嗪100678-200401常溫,避光100mg

*相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品28328-53-210mg
15708-41-5 以兒按四乙酸鐵鈉標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

補(bǔ)骨脂Psoralea corylifolia L. 補(bǔ)骨脂查耳同 28448-85-3 C21H22O4 98% 美他嗪:用于系統(tǒng)適用性試驗(yàn)(Y000009

異菌脲標(biāo)準(zhǔn)品 牛津郡異柳靈標(biāo)準(zhǔn) 異柳靈標(biāo)準(zhǔn)品

 Phosphate (AS)酸標(biāo)準(zhǔn)品7757-87-1 2g酸標(biāo)準(zhǔn)品

苦蘇花皂苷C 366814-42-8 HPLC98%;5mg 訂購|咨詢
84680-54-6 2,4-二錄本基-2-(-1H-咪唑)乙醇標(biāo)準(zhǔn)品 300mg

魚子蘭Chloranthus elatior 4-表可木酸 83945-57-7 C20H30O2 96% 甜茶內(nèi)酯167655

1.5g

Sumatriptan 舒馬曲坦標(biāo)準(zhǔn)品103628-46-2 50mg

保亭哥納香Goniothalamus griffithii Altholactone none 65408-91-5 C13H12O4 95%
腺嘌呤鹽酸鹽shēng huà shì jì容量:25

91079-38-8蛋白胨Proteose peptone

阿姆斯特朗酸,英文名或英文縮寫:1,5- disulfonic acid,級(jí)別:高純,98%,規(guī)格:1

對(duì)二甲基 4-(Dimethylamino),99.0% 100-10-7 25G 通用試劑

/金粉/金海綿/金海棉/Gold 5N 1 國產(chǎn)/進(jìn)口
4-nitnopxenol對(duì)硝基酚5BS,85%

GDX 104(聚二本多孔小球)NA

N-叔丁氧羰基-L-天冬酰,英文名或英文縮寫:Boc-L-asparagine,級(jí)別:BR98.5%,規(guī)格:25

1,2,4-本三羧臘酐 1,2,4-Bqnzqnqtriccrboxylic cnhydridq 22-30-7

每速 C MITOMYCIN C 1920-7-7
線粒體紅色熒光染色試劑盒BBcellProbe M012000T使用說明書阿斯巴甜/阿司帕坦/糖肽/L-天冬酰-L-苯丙酸甲酯/蛋白糖/甜樂/甜味素/N-L-α-天冬酰-L-苯丙酸甲酯/Aspartame BR99% 100 國產(chǎn)/進(jìn)口

VISIGLOAPCHEMILUMINESCENTSUBSTRATE堿性嶙酸酶化學(xué)發(fā)光底物超純級(jí)透明無色液體COLDsigma

聚烯炳安 POLY(cLLYLcMINq) 30221-89-4

*(牛胰)/Trypsin(bovine pancreas) BR,1250;250USP u/mg(1000BAEEu/mg) 25

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