當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞染色>> Propidium Iodide染色液100T免費代測
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更新時間:2017-07-03 14:36:21瀏覽次數(shù):134次
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Propidium Iodide染色液100T免費代測儲存條件: 4℃避光保存。*保存-20℃避光保存。
有效期: 六個月。
產(chǎn)品簡介:
PI染色液可用于細(xì)胞凋亡檢測,也可用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色,染色后可用熒光顯微鏡檢測或流式細(xì)胞儀檢測。PropidiumIodide是一種DNA結(jié)合性染料,其激發(fā)和發(fā)射波長分別為488nm和630nm,產(chǎn)生紅色熒光,但無膜通透性,不能透過活細(xì)胞膜,只能染死細(xì)胞。因此,在熒光顯微鏡下觀察,正常細(xì)胞不能著色,早期凋亡細(xì)胞呈微弱紅光,晚期凋亡細(xì)胞紅光加強,壞死細(xì)胞呈強紅色熒光。也可采用流式細(xì)胞儀利用細(xì)胞形態(tài)上的改變影響它們的光散射特性改變進(jìn)行分析,還可與RNaseA結(jié)合進(jìn)行細(xì)胞周期分析。
Propidium Iodide染色液100T免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
Propidium Iodide染色液100T免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
蕓香 Ruta graveolens L. Rutin,Quercetin 3-O-β-D-rutinoside 蘆丁 153-18-4 C27H30O16 ≥98%
仙茅苷CurculigosidqHPLC≥98%,20mg/支
杯莧甾同 Cyasterone 17086-76-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材全葉青蘭121493-200501TLC法鑒別
STIGMASTEROL 豆固醇純度:>95%
151213-15-9 莫西沙星相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
檸檬 Citrus limonia Osbeck 檸檬酸 77-92-9 C6H8O7 ≥98% 葉綠素A(需干運輸0 461A
伐蟲米言酸鹽標(biāo)準(zhǔn) 伐滅靈標(biāo)準(zhǔn)品 放現(xiàn)同菌標(biāo)準(zhǔn)品
Valsartan *標(biāo)準(zhǔn)品862-53-4 350mg
人參皂苷F1 53963-43-2 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
水杉Metasequoia glyptostroboides Sequosempervirin D 北美紅杉素D 864719-19-7 C21H24O5 ≥95%
鳶尾苷Tqctoridin20mg/支
地黃苷A;地黃甙A Rehmannioside A 81720-05-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
標(biāo)準(zhǔn)品粘菌素130327-200305效價測定
Caryophyllene 石竹烯純度:>95%
心浸液瓊脂shēng huà shì jì容量:2~8℃25毫升
53-16-7雌酮;α-卵胞激素;雌甾酮;雌激素酮Estrone;1, 3, 5-Estratrien-3-ol-17-one;Folliculin;Oestrone
三本膦,英文名或英文縮寫:Tripxenylphosphine,級別:BR,98%,規(guī)格:10克
4-基-6-嘧啶 4-Amino-6-chloropyrimidine,97% 5305-59-9 1G 通用試劑
海藻酸鈉/藻朊鈉/藻膠鈉/褐藻酸鈉/藻朊酸鈉/藻蛋白酸鈉/Sodium alginate AR,98% 500克 國產(chǎn)/進(jìn)口
4,4-二羥基二本砜shēng huà shì jì容量:RT100克
迪克賽300Dexsi l300
EC肉湯100克
α-酮基纈酸鈣鹽 Calcium alpha-ketovaline,≥97.0% 51828-94-5 1G 通用試劑
異環(huán)鱗酰安 IfosfcMidq 3778-73-
Propidium Iodide染色液100T免費代測丙二醛測試盒20個/包RT
507-70-0龍腦Borneol
醌-2-磺酸鈉1毫克RT
乙二醇 2-Ethoxyethanol,≥99% 110-80-5 500ML 通用試劑
偶氮脒類引發(fā)劑V50/2,2-偶氮二(2-甲基丙基咪)/2,2-偶氮二異丁基脒/偶氮二(2基丙脒)鹽酸鹽/偶氮二異丁脒鹽酸鹽/偶氮脒類引發(fā)劑VAZO56/AAPH/AIBA 高純,98% 25克 國產(chǎn)/進(jìn)口
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