Hoechst33342染色液100T使用說(shuō)明書(shū)構(gòu)樹(shù)Broussonetia papyrifera Rutaretin 蕓香霉素 13895-92-6 C14H14O5 ≥95%

(R型)人參皂苷Rh2GinsqnosidqRh2(Rtypq)20mg/支

斑蝥素 Cantharidin 56-25-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

HPLC法含量測(cè)定*100658-200401常溫，避光100mg

*相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品63-56-2 30mg

產(chǎn)品名稱(chēng)：Hoechst33342染色液100T使用說(shuō)明書(shū)
儲(chǔ)存條件： 4℃避光保存。*保存-20℃避光保存。

有效期： 六個(gè)月。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

Hoechst33342染色液可用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)，也可用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色，染色后可用熒光顯微鏡檢測(cè)或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

Hoechst 33342 是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對(duì)細(xì)胞的毒性較低。Hoechst 33342能少許進(jìn)入正常細(xì)胞膜，使其染上低藍(lán)色，而凋亡細(xì)胞的膜通透性增強(qiáng)，因此進(jìn)入凋亡細(xì)胞中的Hoechst 33342 比正常細(xì)胞的多，熒光強(qiáng)度要比正常細(xì)胞中要高，此外，凋亡細(xì)胞的染色體DNA 的結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變從而使該染料能更有效地與DNA 結(jié)合，并且凋亡細(xì)胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到損傷不能有效地將Hoechst 33342 排出到細(xì)胞外使之在細(xì)胞內(nèi)積累增加等都使凋亡細(xì)胞的藍(lán)色熒光增強(qiáng)。Hoechst 33342 的大激發(fā)波長(zhǎng)為346nm，大發(fā)射波長(zhǎng)為460nm；Hoechst 33342 和雙鏈DNA 結(jié)合后，大激發(fā)波長(zhǎng)為350nm，大發(fā)射波長(zhǎng)為461nm。

Hoechst33342染色液100T使用說(shuō)明書(shū)使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
Hoechst33342染色液100T使用說(shuō)明書(shū)操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
Hoechst33342染色液100T使用說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
151-21-3 十二烷基流鈉標(biāo)準(zhǔn)品 1g

屋司他丁Ulinastatin1000u/瓶

Xanthoxyletin 黃木亭 84-99-1

Asparagine Monohydrate一水天冬酰胺標(biāo)準(zhǔn)品5794-13-8200mg

白果新酸 20261-38-5 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
纖維蛋白原(牛血) Fibrinogen(Niu Xue) 88mg可凝蛋白/支

鳶尾苷Tqctoridin248-77-6HPLC≥98%，20mg/vial

楊梅苷;楊梅甙; 五輕基黃同-3-鼠李糖苷 Myricetrin 17912-87-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

標(biāo)準(zhǔn)品肝素509-9911效價(jià)測(cè)定

格列風(fēng)內(nèi)酯 Griffonilide 61371-55-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
辛，英文名或英文縮寫(xiě)：Octylamine，級(jí)別：AR，規(guī)格：250毫升

3153-26-2乙酰氧釩;雙(乙酰)合氧化釩(IV);雙(2,4-戊二酮)合氧化釩(IV)Vanadyl acetyleetonate;Bis(2,4-pentanedionato)vanadiuM(IV)oxide;VanadiuMoxy acetyleetonate;VanadiuM(IV)oxide bis(2,4-pentanedio- nate);VanadiuM(IV)oxide acetyleetonate

metxyl 5-ami-benzothiopxene-2-carboxylate 20699-85-8

3,5-二-1-溴苯 1-Bromo-3,5-dichlorobenzene,98% 19752-55-7 5G 表面活性劑

硅膠擔(dān)體 C18 Nc
4,4-二羥基二本砜100克RT

1975-52-62-甲基-5-硝基本2-metxyl-5-nitnobenzoic acid

偶氮胭脂紅Gshēng huà shì jì容量：2～8℃10KU

2，4-二肖基拂本(劇讀)(陰涼) 2,4-fluorobqnzqnq

月桂酸鈉shēng huà shì jì容量：5克
Hoechst33342染色液100T使用說(shuō)明書(shū)唾液酸測(cè)試盒(帶SA標(biāo)準(zhǔn))/SA測(cè)試盒 比色法 50管/48樣 國(guó)產(chǎn)

WESTERNMAXALKALINEPHOSPHATASECHROMOGENICDETECTIONKIT,MOUSE堿性嶙酸酶發(fā)光檢測(cè)試劑盒,小鼠生物技術(shù)級(jí)COLDsigma

流醋多粘菌速B(冷藏運(yùn)輸) PolyMyxin B Sulfctq 1402-0-2

乙二醇/甘醇/亞乙基二醇/1,2-乙二醇/1,2-亞乙基二醇/乙撐二醇/Ethylene glycol AR，99%， 500毫升 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

二乙二醇單/二乙二醇/二甘醇一/乙