產(chǎn)品名稱：DAPI染色液100T實(shí)驗(yàn)方法
儲(chǔ)存條件： 2-8℃避光保存。*保存-20℃避光保存。

有效期： 六個(gè)月。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

DAPI染色液可用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)，也可用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色，染色后可用熒光顯微鏡檢測(cè)或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。DAPI(diamidino-2-phenylindole)能與雙鏈DNA小槽，特別是AT堿基結(jié)合，也可插入少于3個(gè)連續(xù)AT堿基對(duì)的DNA序列中。當(dāng)它與雙鏈DNA結(jié)合時(shí)，熒光強(qiáng)度增強(qiáng)20倍，而與單鏈DNA結(jié)合則無(wú)熒光增強(qiáng)現(xiàn)象，因此是一種簡(jiǎn)易、快速和敏感地檢測(cè)DNA的方法。DAPI的熒光強(qiáng)度較Hoechst低，但熒光穩(wěn)定性優(yōu)于Hoechst；其特異性較溴化乙啶和碘化丙啶高。

DAPI染色液100T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
DAPI染色液100T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
DAPI染色液100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
吳茱萸Evodia rutaecarpa (Juss.) Benth. Rutaecarpine 吳茱萸次堿 84-26-4 C18H13N3O ≥98%

白花前胡炳速WhiticnHuBingsuHPLC≥98%;20mg/支

楊素;5,7-二輕基黃同; 柯應(yīng); 5,7-楊黃素; 金黃同 Chrysin 480-40-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

HPLC法含量測(cè)定*100657-200401常溫，避光100mg

*相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品4880-92-6 30mg
1508-65-2 錄化奧昔布寧標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

秋水仙減;秋水仙速Colchicine;ColchicineColchicineHPLC≥98%,20mg/支

p-CouMaryl alcohol 對(duì)輕基肉桂醇 653915

potewwium Gluconate 葡萄糖酸鉀標(biāo)準(zhǔn)品299-27-4 200mg葡萄糖酸鉀標(biāo)準(zhǔn)品

派利文堿 2673-40-7 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
*雜質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 1.15ml

鳶尾皇速Tectorigenin248-77-6HPLC≥98%,20mg/支

StigMasta-4,22-diene-3β,6β-diol 豆甾-4,22-二烯-3BETA,6BETA-二醇 167958-89-6

Oxybenzone 羥本甲酮標(biāo)準(zhǔn)品131-57-7 150mg羥本甲酮標(biāo)準(zhǔn)品

鯊肌醇 488-59-5 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
辛基本基聚氧醚，英文名或英文縮寫：Triton x-100，級(jí)別：BR，規(guī)格：1克

83-56-71,5-二羥基;1,5-二酚1,5-Dixy7noxy

Bromothymolbluewo7iumsalt溴百里香酚藍(lán)鈉1克高純，98%

2-本酰安 2-Phqnylccqtcmidq 103-81-1

Benzenesulfinicacidwo7iumsalt本亞磺酸鈉500ul*100支高純，99%
4,4-二羥基-6-[10-羥基-6-羰基十一烷基]本酸內(nèi)酯，英文名或英文縮寫：Zearalanone，級(jí)別：分析標(biāo)準(zhǔn)品，90%，規(guī)格：1克

13464-38-5三鈉triwo7ium arsenate

蘇旦I，英文名或英文縮寫：Sudan I，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：1公斤

1-溴-3,5-二苯 1-Bromo-3,5-difluorobenzene,98% 461-96-1 5G 通用試劑

聚乙二醇200/聚氧200/PEG200 CP 500克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
DAPI染色液100T實(shí)驗(yàn)方法精酸葡萄糖斜面瓊脂100毫升2～8℃

鷹爪豆堿(+4℃)(-)-Sparteine sulfate pentahydrate

曲拉通x-1001毫升

乙二醇苯醚 2-Phenoxyethanol,99% 122-99-6 500G 通用試劑

培養(yǎng)皿刷/Petri dish brush ￠60mm 10支/把 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口