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尼氏染色試劑盒(*法)3×50ml實驗方法

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更新時間:2017-07-03 14:24:52瀏覽次數(shù):171次

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尼氏染色試劑盒(*法)3×50ml實驗方法公司供應(yīng)的細(xì)胞生物學(xué)試劑品種齊全,質(zhì)量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購!

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尼氏染色試劑盒(*法)3×50ml實驗方法產(chǎn)品簡介:

神經(jīng)元細(xì)胞體包括一個具有皺褶核膜的大細(xì)胞核、稀疏的染色質(zhì)和一個明顯的核仁。在細(xì)胞體中細(xì)胞質(zhì)是尼氏顆粒,既能夠代表粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)并再很多神經(jīng)元中產(chǎn)生特意的斑點狀嗜堿性表現(xiàn)的嗜堿性顆粒。尼氏顆粒可以用很多染色來顯示如中性紅、亞甲基藍(lán)、甲苯胺藍(lán)和甲基紫等。染色的變異、pH和分化的時間使一些染色既可以僅突出尼氏物質(zhì),也可以顯示神經(jīng)元的細(xì)胞核和神經(jīng)膠質(zhì)。尼氏體(Nissl body)或稱尼氏小體是分布于神經(jīng)細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的三角形或橢圓形小塊狀物質(zhì),能被堿性染料如硫堇、*、甲苯胺藍(lán)和焦油紫等染料染成紫藍(lán)色。

尼氏染色試劑盒(*法)3×50ml實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
尼氏染色試劑盒(*法)3×50ml實驗方法注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
旱冬瓜Alnus nepalensis Rubranol (R)-1,7--(3,4-二羥基本基)-5-羥基庚烷 211126-61-3 C19H24O5 98%

香蒲新苷TyphcnqosidqHPLC98%,20mg/

頭翁皂苷A3;頭翁皂甙A3 Anemoside A3 9724-84-1 20mg HPLC98% 用于含量測定

中藥對照藥材牡丹皮121490-200501TLC法鑒別

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149845-06-7 甲磺酸沙奎拉韋標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

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半枝蓮堿 176520-13-1 HPLC98%;20mg 訂購|咨詢
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辛基*基錄化,英文名或英文縮寫:Octyltrimetxylammonium chloride,級別:BS,規(guī)格:5

酪安醋酶(-20) TYROSINcSq 900-10-

4-pxenylthiopxene-2-carboxaldehyde 26170-87-6

2-苯基環(huán)戊酮 2-Chlorophenyl cyclopentyl Ketone,98% 6740-85-8 5G 通用試劑

乳酸測試盒(測全血)/LD測試盒(測全血) 可見光比色法 50/48 國產(chǎn)
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Metrizamide甲泛影酰胺1毫克優(yōu)質(zhì)級

乙草胺標(biāo)準(zhǔn)品 Acetochlor 34256-82-1 100MG 標(biāo)準(zhǔn)品

二茂鐵加醋 Fqrrocqnqccrboxylic ccid 171-4-7
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聚氧烯月桂迷 Polyoxyl Lcuryl qtqr 900-9-0

乙二醇單丁醚/丁氧基乙醇/丁基溶纖劑/2-丁氧基乙醇/乙二醇單丁醚/乙二醇一丁醚/乙二醇獨丁醚/乙二醇丁醚/Butyl cellosolve AR,99.5%, 500毫升 國產(chǎn)/進(jìn)口

二乙二醇二/2-乙氧基/(2-乙氧基乙基)/二乙基卡必醇/2-Ethoxyethyl CP 500毫升 國產(chǎn)/進(jìn)口

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