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肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)方法及注意事項(xiàng)

時間:2018-1-30閱讀:156
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肌衛(wèi)星細(xì)胞介紹

肌肉衛(wèi)星細(xì)胞是骨骼肌中具有分化增殖潛能的肌源性干細(xì)胞,由Mauro在對青蛙脛前肌的電鏡研究中發(fā)現(xiàn)。衛(wèi)星細(xì)胞位于骨骼肌細(xì)胞基膜與肌膜之間,屬單核細(xì)胞,胞核扁圓,緊貼于肌膜,,核內(nèi)異染色質(zhì)較稀疏,細(xì)胞質(zhì)較少。衛(wèi)星細(xì)胞在正常狀態(tài)下處于靜止期,當(dāng)肌肉受損、壞死或負(fù)荷過重時,該細(xì)胞被激活,開始增殖有絲分裂、分化功能蛋白的表達(dá)并融合成多核,后形成肌纖維。大量研究證實(shí),衛(wèi)星細(xì)胞對骨骼肌受創(chuàng)傷后肌纖維的再生和修復(fù)起著重要的作用。

細(xì)胞特性

1)來源:6天左右的C57BL/6小鼠

2)含量:>5x105個/mL

3)鑒定:Desmin、α-SCA免疫熒光染色法

4)純度:>85%

5)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性

6)規(guī)格:1mL凍存管包裝

運(yùn)輸和保存: 1mL凍存管干冰運(yùn)輸。

細(xì)胞使用:僅供科研使用。

肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)方法

1)*培養(yǎng)基:小鼠肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)基

培養(yǎng)方式:不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)

注意事項(xiàng):

1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們。

2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。

3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。

4.肌衛(wèi)星細(xì)胞所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

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