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更新時間:2017-07-25 11:57:52瀏覽次數(shù):81次
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適用領域 | 科研 |
人膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價格的操作方法:
產品名稱:人膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價格
英文名稱:Human Annexin Ⅴ,ANX-Ⅴ ELISA Kit
貯藏條件:2-8℃低溫保存
有效期:6個月
特異性:可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床
產品名稱 | |
英文名稱 | Human Annexin Ⅴ,ANX-Ⅴ ELISA Kit |
分類 | 人elisa酶聯(lián)免疫試劑盒 |
人膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價格樣品收集、處理及保存 :
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價格操作步驟:
1、加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl,然后再加待測樣品10µl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
2、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此
重復5次,拍干。
5、加酶:每孔加入酶標試劑50µl,空白孔除外。
6、顯色:每孔先加入顯色劑A50µl,再加入顯色劑B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
10 分鐘.
7、終止:每孔加終止液50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
8、測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
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