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更新時間:2017-07-20 10:50:45瀏覽次數(shù):127次
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
人色素上皮衍生因子(PEDF)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒售后服務(wù)的操作方法:
產(chǎn)品名稱:人色素上皮衍生因子(PEDF)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒售后服務(wù)
英文名稱:Human pigment epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit
貯藏條件:2-8℃低溫保存
有效期:6個月
特異性:可同時檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Human pigment epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit |
分類 | 人elisa酶聯(lián)免疫試劑盒 |
人色素上皮衍生因子(PEDF)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒售后服務(wù)樣品收集、處理及保存 :
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人色素上皮衍生因子(PEDF)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒售后服務(wù)操作步驟:
1、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl,然后再加待測樣品10µl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
2、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此
重復(fù)5次,拍干。
5、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50µl,空白孔除外。
6、顯色:每孔先加入顯色劑A50µl,再加入顯色劑B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
10 分鐘.
7、終止:每孔加終止液50µl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
8、測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
羧甲基纖維素CM-23100毫克2~8℃
4460-86-02,4,5-*氧基;細(xì)辛醛2,4,5-Trimetxoxy;Asarylaldehyde;2,4,5-Trixy7noxy trimetxyl
3-metxyl-2-(4,4,5,5-tetrametxyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl) 631909-35-8
N-乙?;窠?jīng)酸甲... N-Acetylneic Acid Methyl Est,≥9... 22900-11-4 1G 通用試劑
四正丁基拂化銨,1M四輕呋喃溶液 Nc
Aluminumoxideactive活性礬土500克BR,97%
7789-38-0溴酸鈉wo7iumbroMate
Decanoicacid羊蠟酸250毫克BR,75%
無水亞鉀 Potassium sulfide anhydrous,90% 10117-38-1 25G 通用試劑
丙基*氧基硅烷 Trimethoxy(propyl)silane,≥97.0% 1067-25-0 100ML 通用試劑
L-thyroxinewo7ium(2S)-2-基-3-[4-(4-羥基-3,5-二-本氧基)-3,5-二本基]丙酸鈉/L-甲狀腺胺鈉10克BR,97%
10294-66-3硫代鉀potewwium thiosulfate
Pyrimidine間(二)氮本25克BR,98%
錫酸鈉 Sodium stannate,42-45% 12058-66-1 250G 通用試劑
,≥98.0% 100ML 通用試劑
Saos-2(人骨肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
兔晶體上皮細(xì)胞永生系;N/N1003A(RLE)
CD86 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD86 / B7-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
QG-56細(xì)胞,人肺扁平上皮癌細(xì)胞 中國倉鼠倉鼠卵巢細(xì)胞亞株,CHO-K1細(xì)胞 CM-M010小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人表皮黑色素細(xì)胞-中色素HEM-m
Gibco 12558-011 TM-C100 Complete Medium,(system) 1 set
小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基MM-prf
HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
H-4-IL-E 大鼠肝細(xì)胞瘤細(xì)胞 H-4-IL-E hepatoma cells of rats MEM90%(內(nèi)2mM Glutamin)+10%胎牛血清,補加非必須氨基酸(100x)
EGF Protein Mouse 重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白
MuM-2B(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人色素上皮衍生因子(PEDF)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒售后服務(wù)NELL2 Others Human 人 NELL2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人細(xì)胞;Hela 229 [HeLa229]
CM-R038大鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
Ca Ski, 人細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞,CV-1(M)細(xì)胞 PA-1(人卵巢畸胎瘤細(xì)胞)
小鼠T淋巴細(xì)胞;Cl.Ly1+2-/9
NAALADL1 Others Human 人 NAALADL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
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