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Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-587操作步驟

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產(chǎn)品名稱

生長(zhǎng)特性

價(jià)格

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-587操作步驟

貼壁生長(zhǎng)

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細(xì)胞名稱   Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-587操作步驟
形態(tài)特性 上皮樣

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使HEC-1B細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS;400ug/ml G418

傳代方法 消化3-5分鐘;1:2傳代;3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。

傳代情況 C3

凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測(cè) 陰性

STR Amelogeninx,x;CSF1PO10,12;D12S39118,19D13S31711,11;D16S53911,12;D18S5116,20;D19S43313,13;D21S1130,31D2S133818,19;D3S135815,15;D5S81811,13;D6S104312,18D7S8209,11;D8S117913,14;FGA21,21;Penta E11,11;TH016,7TPOX8,11;vWA18,18;

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-587操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源, 所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生*的影響。來(lái)自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-587操作步驟操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
人滑膜細(xì)胞cDNAHS cDNA

TNFRSF11A Others Rat 大鼠 TNFRSF11A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人內(nèi)臟脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

RLE-6TN細(xì)胞,大鼠肺上皮Ⅱ型細(xì)胞 PC-3(人前列腺癌細(xì)胞) 大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A

EFNB2 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

16HBE(人支氣管上皮樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH3
WARS Others Human WARS / TrpRS 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CM-H006人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

原代上皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml

恒河猴腎細(xì)胞;MMK3 人淋巴樣Burkitt淋巴瘤細(xì)胞,EB-3[EB3]細(xì)胞 TE-11(食管癌細(xì)胞)

人急性早幼粒白血病細(xì)胞;HL-60

EFNA3 Others Human EphrinA3 / EFNA3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CM-H006人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

WARS Others Human WARS / TrpRS 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

原代上皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml

恒河猴腎細(xì)胞;MMK3 人淋巴樣Burkitt淋巴瘤細(xì)胞,EB-3[EB3]細(xì)胞 TE-11(食管癌細(xì)胞)

人急性早幼粒白血病細(xì)胞;HL-60

EFNA3 Others Human EphrinA3 / EFNA3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
葡萄球菌選擇性瓊脂StaphylococcusSelectiveAgar250用于凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)  進(jìn)口分裝  長(zhǎng)春質(zhì)堿(標(biāo)準(zhǔn)品)  Catharanthine  號(hào):  2468-21-5  質(zhì)量規(guī)格:  >98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品

煌綠瓊脂BrilliantGreenAgar250用于沙門氏菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法進(jìn)口分裝  *,美松(標(biāo)準(zhǔn)品)  Dexamethasone  號(hào):  18296  質(zhì)量規(guī)格:  HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

腸球菌瓊脂(膽鹽
人腦腸肽elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  漢*(標(biāo)準(zhǔn)品)  Wogonoside  號(hào):  51059-44-0  質(zhì)量規(guī)格:  HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人囊蟲病抗體elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  漢黃芩素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Wogonin  號(hào):  632-85-9  質(zhì)量規(guī)格:  HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  蒿本內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ligustilide  號(hào):  4431-01-0; 81944-09-4  質(zhì)量規(guī)格:  HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9Velisa試劑盒  進(jìn)口分裝  *(標(biāo)準(zhǔn)品)  Artem  號(hào):  71963-77-4  質(zhì)量規(guī)格:  HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-587操作步驟人二肽基肽酶X(DPP10)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  進(jìn)口分裝  76-66-4  Rhynchophylline  C22H28N2O4  384.47  Alkaloids  >=98%  20mg

OJ抗體/抗異亮酰tRNA合成酶抗體(OJ/IleRS)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  進(jìn)口分裝  1866-39-3  4-Methylcinnamic acid  C10H10O2  162.19  Phenylpropanoids  >=99%  100mg

人白介素10受體β(IL10Rβ)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  進(jìn)口分裝  6164-47-2  Protopine hydrochloride  C20H20ClNO5  389.83  Alkaloids  >=98%  20mg

人載脂蛋白E(ApoE)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  進(jìn)口分裝  1803152  Deltaline  C27H41NO8  507.62  Alkaloids  >=98%  10mg

 

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