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Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1975-Cas9-595操作步驟

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更新時(shí)間:2017-06-28 09:22:36瀏覽次數(shù):134次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1975-Cas9-595操作步驟的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購(gòu)。
細(xì)胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1975-Cas9-595操作步驟
形態(tài)特性 上皮樣

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使NCI-H1975細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;400ug/ml G418

傳代方法 1:3~1:6傳代;每周換液2~3次。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-

STR Amelogeninx,x;CSF1PO12,12;D12S39117,17;D13S31710,13;D16S5399,12;D18S5113,13;D19S43315,15.2;D21S1128,28D2S133817,17;D3S135814,15D5S81811,12;D6S104312,12D7S8208,8D8S117913,13;FGA21,24Penta E12,12;TH017,7;TPOX8,11vWA18,18;

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A

產(chǎn)品名稱

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1975-Cas9-595操作步驟

生長(zhǎng)特性

貼壁生長(zhǎng)

發(fā)貨地

上海

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1975-Cas9-595操作步驟的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1975-Cas9-595操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn): 
1
)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 
2
)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。 
3
)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 
4
800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 
5
)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 
6
)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
CL-0132KG-1(人急性骨髓性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

TNFRSF14 Others Cynomolgus 食蟹猴 HVEM / TNFRSF14 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人氣管上皮細(xì)胞裂解物HTEpiCL

Sw626細(xì)胞,人卵巢癌細(xì)胞 鮭魚胚胎細(xì)胞,RTG細(xì)胞 破骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

BT-20(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HBSMC Pellet 人支氣管平滑肌細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells
SIGIRR Others Human SIGIRR / TIR8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0456TM4(正常小鼠Sertoli細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞RNAHBdSF miRNA5 μg

T24細(xì)胞,人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 大鼠肝癌細(xì)胞(wistar 大鼠),CBRH7919細(xì)胞 RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元

Ishikawa(人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

hPC-PL-c 人類胎盤周細(xì)胞(hPC-PL) 500,000cells 小鼠巨噬細(xì)胞MMa
CL-0456TM4(正常小鼠Sertoli細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

SIGIRR Others Human SIGIRR / TIR8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

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T24細(xì)胞,人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 大鼠肝癌細(xì)胞(wistar 大鼠),CBRH7919細(xì)胞 RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元

Ishikawa(人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

hPC-PL-c 人類胎盤周細(xì)胞(hPC-PL) 500,000cells 小鼠巨噬細(xì)胞MMa
102495000ml/incubationmedia102495000ml/  進(jìn)口分裝  Polygalacic acid  遠(yuǎn)志酸  22338-71-2  20mg

10812胰蛋白胨大豆肉湯(TSB)  進(jìn)口分裝  Alisol C monoacetate  澤瀉醇 C-23-醋酸酯  26575-93-9  20mg

12703小牛浸液肉湯  進(jìn)口分裝  Luteolin-7-O-glucuronide  木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷  29741-10-4  20mg

10167Eug
人中性粒細(xì)胞防御素1-3elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  *(30%)  2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole  號(hào):  89250-26-0  質(zhì)量規(guī)格:  >30%

人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  Fmoc-D-4-甲氧基苯丙酸  FMOC-D-4-METHOXYPHE  號(hào):  201335-88-8  質(zhì)量規(guī)格:  BR

人脂氧素A4elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  3-奎寧環(huán)鹽酸鹽  3-Quinuclidinone HCl  號(hào):  1193-65-3  質(zhì)量規(guī)格:  >98%

人脂磷壁酸elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  苯咪唑  Flubendazole  號(hào):  31430-15-6  質(zhì)量規(guī)格:  >98%,BR
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1975-Cas9-595操作步驟小鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISAKit  進(jìn)口分裝  異綠原酸B  Isochlorogenic acid B(3,4)  14534-61-3  C25H24O12  98%  詢價(jià)

小鼠肌球蛋白(MYS)ELISAKit  進(jìn)口分裝  新*內(nèi)酯  Neoandrographolide  27215-14-1  C26H40O8  98%  詢價(jià)

小鼠Ⅱ型膠原(Col)ELISAKit  進(jìn)口分裝  松蘿酸  Usinic acid  125-46-2  C18H16O7  98%  詢價(jià)

豬二胺氧化酶(DAO)ELISAKit  進(jìn)口分裝  土莫酸  Tumulosic acid  20126-76-5  C10H18O  98%  詢價(jià)

 

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