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人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17操作步驟

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更新時(shí)間:2017-06-26 16:07:48瀏覽次數(shù):205次

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適用領(lǐng)域 科研
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產(chǎn)品名稱

生長(zhǎng)特性

價(jià)格

人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17操作步驟

貼壁生長(zhǎng)

電詢

細(xì)胞名稱   人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17操作步驟
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 來(lái)自于4周齡女孩胚胎,1975年中國(guó)醫(yī)學(xué)*昆明醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所建立;可作為轉(zhuǎn)染宿主,用于肺損傷或分化的研究。

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 新生牛血清,10%;水解乳蛋白,10%

傳代方法 12-14

傳代情況 P10

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)液+20%牛血清+10%DMSO

支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-

STR Amelogenin:X; D7S820:9,11;CSF1PO:12;D13S317:9,12D16S539:11,13;D18S51:14,17D21S11:29,30;D3S1358:16D5S818:13;D8S1179:11,13;FGA:20,27;PentaD:9,13;PentaE:12,15;TH01:7;TPOX:10,11;vWA:14,18

同工酶 B,NP,G8PG,MD,AST

染色體

使用權(quán)限 A
人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源, 所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生*的影響。來(lái)自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17操作步驟操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
人癌細(xì)胞;MDA-MB-468

人脂肪細(xì)胞-皮下(HPA-s)(1×106 )

CM-R080大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

C3H/An小鼠結(jié)締組織細(xì)胞(L929-TK-);LTK- 小鼠腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞 Mouse

FOLR1 Others Mouse 小鼠 FOLR1 / FR-alpha 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
EPHB6 Others Mouse 小鼠 EphB6 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

AGS人胃腺癌細(xì)胞

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(人膀胱癌細(xì)胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]

犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2) 腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞,Y1細(xì)胞 RCFBF細(xì)胞,兔角膜前基質(zhì)層成纖維細(xì)胞

人胚胎肺成纖維細(xì)胞;WI-38

HA Others H5N8 甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
AGS人胃腺癌細(xì)胞

EPHB6 Others Mouse 小鼠 EphB6 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(人膀胱癌細(xì)胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]

犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2) 腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞,Y1細(xì)胞 RCFBF細(xì)胞,兔角膜前基質(zhì)層成纖維細(xì)胞

人胚胎肺成纖維細(xì)胞;WI-38

HA Others H5N8 甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
*鈣/羅蘇伐他汀鈣  進(jìn)口分裝  雞血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒

*(標(biāo)準(zhǔn)品)  進(jìn)口分裝  巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒

*(速尿)  進(jìn)口分裝  大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒

米非司  進(jìn)口分裝  大鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒
HektoenEntericAgarincubationmediaHektoenEntericAgar  進(jìn)口分裝  鼠李糖  標(biāo)準(zhǔn)品別名:    英文名稱:  L-Rhamnose monohydrate  編號(hào):  6155-35-7

CHROMagarTM沙門菌顯色培養(yǎng)基用于沙門菌的分離、鑒別和計(jì)數(shù)374gincubationmediaCHROMagarTM沙門菌顯色培養(yǎng)基用于沙門菌的分離、鑒別和計(jì)數(shù)374g  進(jìn)口分裝  五味子酯甲  標(biāo)準(zhǔn)品別名:    英文名稱:  Schisantherin A  編號(hào):  58546-56-8

CHROMagarTMSalmonellaincubationmediaCHROMagarTMSalmonella  進(jìn)口分裝  松柏醛  標(biāo)準(zhǔn)品別名:  4-羥基-3-甲氧基肉桂醛  英文名稱:  4-Hydroxy-3-methoxycinnamaldehyde  編號(hào):  458-36-6

三糖鐵瓊脂根據(jù)葡萄糖、乳糖和蔗糖的發(fā)酵及硫化氫的產(chǎn)生、鑒定革蘭氏陰性菌500gincubationmedia三糖鐵瓊脂根據(jù)葡萄糖、乳糖和蔗糖的發(fā)酵及硫化氫的產(chǎn)生、鑒定革蘭氏陰性菌500g  進(jìn)口分裝  鉤吻堿  標(biāo)準(zhǔn)品別名:  常綠黃素馨堿、鉤吻素甲、鉤吻堿鉀  英文名稱:  Gelsemine  編號(hào):  509-15-9
人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17操作步驟XLD瓊脂250選擇性培養(yǎng)基,用于志賀氏菌的選擇性培養(yǎng)(FDA標(biāo)準(zhǔn))incubationmediaXLD瓊脂250選擇性培養(yǎng)基,用于志賀氏菌的選擇性培養(yǎng)(FDA標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)口分裝  醋酸胰高血糖素  Glucagon Acetate  號(hào):  16941-32-5  質(zhì)量規(guī)格:  purity>97%,BR

戊烷脒50mg加入戊烷脒多粘菌素瓊脂incubationmedia戊烷脒50mg加入戊烷脒多粘菌素瓊脂  進(jìn)口分裝  二磺酸拉帕替尼(標(biāo)準(zhǔn)品)  Lapatinib Ditosylate  號(hào):  388082-78-8  質(zhì)量規(guī)格:  HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

PEA瓊脂  進(jìn)口分裝  MUG;4-甲基傘型-beta-D-葡糖苷酸  4-MUG  號(hào):  6160-80-1  質(zhì)量規(guī)格:  >98%,BR

蠟樣芽孢桿菌顯色培養(yǎng)基CRM0051000ml用于食品樣本中蠟樣芽孢桿菌的快速分離和鑒定。  進(jìn)口分裝  *  Paromomycin Sulfate  號(hào):  1263-89-4  質(zhì)量規(guī)格:  675 U/mg,USP28

 

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