我公司提供的輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒100T規(guī)格方法分類：紫外分光光度法、可見分光光度法、微量法、酶法、高效液相色譜法本方法提供代測(cè)服務(wù)!咨詢！
產(chǎn)品名稱：?輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒100T規(guī)格
規(guī)格：100T 測(cè)試方法：高效液相色譜法

測(cè)定意義

輔酶ⅡNADP(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，NADP+和NADPH分別是磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應(yīng)中主要的氫受體和供體。NADP(H)含量和NADPH/NADP+比值與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應(yīng)密切相關(guān)。較高的NADP(H)含量和NADPH/NADP+比值說明細(xì)胞處于較強(qiáng)的磷酸戊糖代謝途徑，生物合成能力旺盛，抗氧能力較強(qiáng)。NADPH/NADP+比值升高也可抑磷酸戊糖途徑的進(jìn)行。

輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒100T規(guī)格測(cè)定原理

NADP+和NADPH在254 nm下有吸收峰，利用高效液相色譜法在相應(yīng)波長(zhǎng)下測(cè)定其含量。

需自備的儀器和試劑

高效液相色譜儀、低速離心機(jī)、溶劑抽濾裝置、針頭式過濾器（水系，50個(gè)，0.22μm）、濾膜（水系和有機(jī)系各2個(gè)，0.45μm）、C18柱（4.6 ×150 mm）、可調(diào)式移液器、樣品瓶（50個(gè)，2mL）、乙腈（120 mL）、甲醇（色譜級(jí)，300 mL）、蒸餾水
注：若用自動(dòng)進(jìn)樣器，需要樣品瓶，測(cè)定時(shí)將不少于1mL的樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入樣品瓶中。無自動(dòng)進(jìn)樣器，需手動(dòng)進(jìn)樣時(shí)，用進(jìn)樣針將不少于20ul的樣品或標(biāo)準(zhǔn)品打入進(jìn)樣閥。

輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒100T規(guī)格成及試劑配制
1：預(yù)包被板: 96T/48T
2：酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1
3：標(biāo)準(zhǔn)品: -6 0.5mL x 2
4：EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5：標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6：顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7：終止液: 1N 12mL x 1
8：濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1
輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒100T規(guī)格注意事項(xiàng)：
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免*孔與Z后一孔間的時(shí)間間隔過大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個(gè)標(biāo)本），如果對(duì)本試劑盒有任何疑問，可和所購(gòu)經(jīng)銷商， 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒100T規(guī)格操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6 個(gè)濃度）、空白孔、待測(cè)樣品組。 注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中；空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對(duì)照孔除外）。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次，用吸水紙*拍干。 7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。
100684    *    100684-200401    HPLC法含量測(cè)定        100mg
100685    *    100685-200401    UV法含量測(cè)定        100mg
100686    *    100686-200401    含量測(cè)定        100mg
100687    *    100687-200401    含量測(cè)定        100mg
100688    *    100688-200401    HPLC法含量測(cè)定        50mg
100689    *    100689-200401    含量測(cè)定        100mg
100690    托芬那酸    100690-200401    UV含量測(cè)定        100mg
100691    鹽酸阿比朵爾    100691-200401    含量測(cè)定        100mg
100692    *    100692-200501    含量測(cè)定        100mg
100693    *    100693-200501    含量測(cè)定        100mg
100694    單*     100694-200401    HPLC法含量測(cè)定        50mg
100695    2-單*    100695-200401    供檢查用        20mg
100696    *酯    100696-200401    含量測(cè)定        200mg
100697    馬來酸*    100697-200401    含量測(cè)定        100mg
100698    *    100698-200501    HPLC法含量測(cè)定        100mg

*過氧化物酶/GPX/GSH-Px，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，生物技術(shù)級(jí)，100u/mg1毫克 9013-66-5保存：-20℃
，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，5毫克 
中文名稱： *過氧化物酶 
英文名稱： GSH-Px 
其他英文名稱： GPX；Glutathione Peroxidase from bovine erythrocytes 
產(chǎn)品規(guī)格： 生物技術(shù)級(jí)，100u/mg 
包裝： 1毫克/5毫克 
號(hào)：9013-66-5 
分子量：～80000
級(jí)別：BioChemika
活力：～100 units/mg 
輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒100T規(guī)格活力定義：1 U corresponds to the amount of enzyme which catalyzes the oxidation by H2O2 of 1 μmol reduced glutathione to oxidized glutathione per minute at pH 7.0 and 25℃
性狀：粉末
用途：生化研究。
保存：-20℃