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更新時(shí)間:2017-07-18 23:42:46瀏覽次數(shù):131次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)我公司提供的NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)測試盒50管/48樣?規(guī)格方法分類:紫外分光光度法、可見分光光度法、微量法、酶法、高效液相色譜法本方法提供代測服務(wù)!咨詢!
產(chǎn)品名稱:NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)測試盒50管/48樣?規(guī)格
規(guī)格:50管/48樣 測試方法:紫外分光光度法
測定意義:
ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細(xì)胞、動物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應(yīng),產(chǎn)生丙酮酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應(yīng),是蘋果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來植物ME活性測定較多,已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點(diǎn)。根據(jù)輔酶專一性和對底物特異性的不同,可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
測定原理:
NAD-ME催化NAD+還原成NADH,在340nm下測定NADH增加速率。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)測試盒50管/48樣?規(guī)格成及試劑配制
1:預(yù)包被板: 96T/48T
2:酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1
3:標(biāo)準(zhǔn)品: -6 0.5mL x 2
4:EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5:標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6:顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7:終止液: 1N 12mL x 1
8:濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1
NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)測試盒50管/48樣?規(guī)格注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免*孔與Z后一孔間的時(shí)間間隔過大,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)測試盒50管/48樣?規(guī)格操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個(gè)濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。 7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。
1g 菊花對照藥材 The control medicinal?Chrysanthemum
1g 桔梗對照藥材 Platycodon grandiflorum?control medicine
1g 荊芥對照藥材 Herba schizonepetae?control medicine
1g 金蕎麥對照藥材 Golden buckwheat?control medicine
1g 九香蟲對照藥材 Nine pest?control medicine
1g 黃附片對照藥材 Yellow?tablets?control medicine
1g 紅花對照藥材 Safflower?control medicine
1g 何首烏對照藥材 Polygonum multiflorum?control medicine
1g 黃精對照藥材 Yellow fine?control medicine
1g 黃連對照藥材 Coptis?control medicine
1g 干姜對照藥材 Ginger?control medicine
1g 龜甲對照藥材 The tortoise shell?control medicine
原氨酸;O-(對羥基苯基)-3,5-二碘-L-*;3,5-二碘-L-甲狀腺素 英文名稱: BR含量:≥98.0%比旋光度:+19~ +23o(C=4.5, 1mol/L HCl:EtOH=2:3)性狀:淡褐色或棕色粉末。用途:生化研究保存:-20℃N-(γ-L-谷氨酰)-1-萘胺/N-(γ-L-谷氨酰)-α-萘胺/N-(r-L-Glutamyl)-1-naphthylamide 1克 A0188 ,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, BR 51012-91-1 2~8℃,避光 中文名稱: N-(γ-L-谷氨酰)-1-萘胺 其他中文名稱: N-(γ-L-谷氨酰)-α-萘胺 英文名稱: N-(r-L-Glutamyl)-1-naphthylamide 其他英文名稱: N-(7-γ-glutamyl)-α-naphthylamide 產(chǎn)品規(guī)格: BR 包裝:1克 號:51012-91-1 C15H18N2O4=290.322級別:BR比旋光度:+27~+28.2°(c=3,1mol/L鹽酸中)層析試驗(yàn):合格性狀:土黃色結(jié)晶。濕品在空氣中易變紅色。溶于熱水(易被水解),微溶于乙醇。熔點(diǎn)185~188℃。用途:生化研NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)測試盒50管/48樣?規(guī)格究。γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶的底物;原發(fā)性和繼發(fā)性肝癌的診斷試劑;蛋白水解酶的組織化學(xué)底物。保存:2~8℃,避光鹽酸-L-白氨酰-2-萘胺/L-亮氨酰-2-萘胺鹽酸鹽/L-白氨酰-β-萘胺鹽酸鹽/鹽酸-L-亮氨酰-2-萘胺/L(+)-亮氨酰-2-萘基鹽酸氨/L-Leucyl-2-naphthylamide hydrochloride 1克 A0190 ,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, BR,98% 893-36-7 避光,-20℃ 中文名稱: 鹽酸-L-白氨酰-2-萘胺 其他中文名稱: L-亮氨
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