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更新時間:2017-07-18 23:23:55瀏覽次數(shù):114次
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產(chǎn)品名稱:輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒50管/48樣規(guī)格
規(guī)格:50管/48樣 測試方法:高效液相色譜法
測定意義:
輔酶ⅡNADP(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,NADP+和NADPH分別是磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應中主要的氫受體和供體。NADP(H)含量和NADPH/NADP+比值與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應密切相關(guān)。較高的NADP(H)含量和NADPH/NADP+比值說明細胞處于較強的磷酸戊糖代謝途徑,生物合成能力旺盛,抗氧能力較強。NADPH/NADP+比值升高也可抑磷酸戊糖途徑的進行。
測定原理:
NADP+和NADPH在254 nm下有吸收峰,利用高效液相色譜法在相應波長下測定其含量。
需自備的儀器和試劑:
高效液相色譜儀、低速離心機、溶劑抽濾裝置、針頭式過濾器(水系,50個,0.22μm)、濾膜(水系和有機系各2個,0.45μm)、C18柱(4.6 ×150 mm)、可調(diào)式移液器、樣品瓶(50個,2mL)、乙腈(120 mL)、甲醇(色譜級,300 mL)、蒸餾水
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒50管/48樣規(guī)格注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與Z后一孔間的時間間隔過大,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響 實驗的準確性以及重復性。
3. 孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應。
5. 建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,應對樣品進行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運輸過程導致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔產(chǎn)品本身以外的任何損失。
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒50管/48樣規(guī)格成及試劑配制
1:預包被板: 96T/48T
2:酶標記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1
3:標準品: -6 0.5mL x 2
4:EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5:標記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6:顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7:終止液: 1N 12mL x 1
8:濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒50管/48樣規(guī)格操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設標準 品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設置復孔。
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標板 5 次,用吸水紙*拍干。 7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。
20mg 9001-74-5 *酶 Penicillinase
20mg 123748-68-5 七葉皂苷A Seven leaf?saponin A
20mg 81-54-9 羥基茜草素 Purpurin
20mg 33457-62-4 榿木酮 Alder?ketone
20mg 480-39-7 喬松素 Qiao Songsu
20mg 218916-52-0 千金子二萜醇二乙酰苯甲酰酯 Thousands of?gold?two?terpene alcohol?two?acetyl?benzoyl?ester
5mg 578-74-5 芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 Apigenin?-7-O- beta?-D-?glucopyranoside
20mg 2680-81-1 去氫二異* Go to the?hydrogen?two?isoeugenol
20mg 67-47-0 5-羥甲基糠醛 5-?hydroxymethyl furfural
20mg 442-51-3 去氫駱駝蓬堿 Harmine
20mg 51-35-4 L-羥* L- hydroxyproline
20mg 88495-63-0 * Artesunate
20mg 20977-05-3 * Seven yezao sodium
20mg 5442/12/6 * Norcantharidin
20mg 7085-55-4 * Troxerutin
20mg 22608-11-3 去甲氧基姜黃素 Demethoxycurcumin
20mg 114-49-8 * Scopolamine hydrobromide
20mg 524-30-1 秦皮苷 Fraxin
99.0%(HPLC)Glupa-carboxylate free acid(enzymatically) :≥87.0%熔點:170~180℃摩爾旋光度:+32±2oPH:4.0~6.0性狀:至黃色結(jié)晶粉末用途:生化研究。γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶的底物保存:2~8℃氧化型*/N-(N-L-γ-谷胺?;?L-半胱胺?;?*-2,2-二硫化物/L-*(氧化型)/氧化*/GSSG 1克 A0163 日本 BR,99% 27025-41-8 RT 10克 日本 100克 日本中文名稱: 氧化型* 其他中文名稱: N-(N-L-γ-谷胺?;?L-半胱胺?;?*-2,2-二硫化物;L-*(氧化型);氧化* 英文名稱: GSSG 其他英文名稱: Glutathione oxidized 產(chǎn)品規(guī)格: BR,99% 包裝:1克/10克/100克號:27025-41-8C20H32N6O12S2=612.63含量:≥99.0%比旋光度:-96~-106o 鑒別:合格重金屬:≤20ppm水分:≤8.0%灼燒殘渣:≤0.5%單一雜質(zhì):≤1.0%總雜質(zhì):≤2.0%性狀:微黃色粉末。溶于水,不溶于乙醇。輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒50管/48樣規(guī)格本品1分子能結(jié)合約2分子的溶劑(水、乙醇和丙酮)。在高真空、高溫(大于100℃),能除去結(jié)合的溶劑,同時部分分解,冷凍不能除去結(jié)合的溶劑。熔點182~185℃。有刺激性用途:生化研究。酶法測定NADP和NADPH的氫受體。保存:RT還原型*/L-還原型*/5-L-谷氨酰-L-半胱氨酰*/GSH 5克 A0164 日本 BR,99% 70-18-8 RT 25
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