我公司提供的NADP-蘋果酸脫氫酶（NADP-MDH）測(cè)試盒100管/96樣規(guī)格方法分類：紫外分光光度法、可見分光光度法、微量法、酶法、高效液相色譜法本方法提供代測(cè)服務(wù)!咨詢！
產(chǎn)品名稱：NADP-蘋果酸脫氫酶（NADP-MDH）測(cè)試盒100管/96樣規(guī)格
規(guī)格：100管/96樣 測(cè)試方法：微量法
測(cè)定意義：
MDH （EC 1.1.1.37）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一，催化蘋果酸形成草酰乙酸；相反，胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物， 連接多條重要的代謝途徑。因此，MDH在細(xì)胞多種生理活動(dòng)中扮演著重要的角色，包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性，MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH， NADP-MDH主要存在于真核細(xì)胞中。
測(cè)定原理：
NADP-MDH催化NADPH還原草酰乙酸生成蘋果酸，導(dǎo)致340nm處光吸收下降。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

NADP-蘋果酸脫氫酶（NADP-MDH）測(cè)試盒100管/96樣規(guī)格成及試劑配制
1：預(yù)包被板: 96T/48T
2：酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1
3：標(biāo)準(zhǔn)品: -6 0.5mL x 2
4：EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5：標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6：顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7：終止液: 1N 12mL x 1
8：濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1
NADP-蘋果酸脫氫酶（NADP-MDH）測(cè)試盒100管/96樣規(guī)格注意事項(xiàng)：
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免*孔與Z后一孔間的時(shí)間間隔過大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個(gè)標(biāo)本），如果對(duì)本試劑盒有任何疑問，可和所購(gòu)經(jīng)銷商， 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
NADP-蘋果酸脫氫酶（NADP-MDH）測(cè)試盒100管/96樣規(guī)格操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6 個(gè)濃度）、空白孔、待測(cè)樣品組。 注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中；空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對(duì)照孔除外）。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次，用吸水紙*拍干。 7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。
包裝：1克/5克/25克號(hào)：1963-21-9C7H14N2O3=174.20級(jí)別：BR含量：≥98.0%比旋光度：-19.5±1°PH：5.5～6.5性狀：結(jié)晶粉末用途：生化研究保存：RTL-甘-甘-白三肽/甘氨酰-甘氨酰-L-*/Gly-Gly-Len    1克    A0130    ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，    BR，98%    14857-82-0    RT            5克        ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，    25克        ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，中文名稱： L-甘-甘-白三肽 其他中文名稱： 甘氨酰-甘氨酰-L-* 英文名稱： Gly-Gly-Len 其他英文名稱： Glycylglycyl-L-leucine 產(chǎn)品規(guī)格： BR,98% 包裝：1克/5克/25克號(hào)：14857-82-0C10H19N3O4=245.28級(jí)別：BR含量：≥98.0%比旋光度：-18.5～-19.5°熔點(diǎn)：188～192℃鑒別：呈正反應(yīng)鐵鹽：≤10ppm重金屬：≤10ppm砷鹽：≤1ppm干燥失重：≤0.50%灼燒殘?jiān)?le;0.10%性狀：結(jié)晶粉末用途：生化研究保存：RTL-甘-甘-甘三肽/甘氨酰-甘氨酰-L-*/二甘氨酰*/三甘氨肽/三*/Gly-Gly-Gly    1克    A0130-1    ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，    BR，98%    556-33-2    RT            5克        ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChemHPLC≥99%，20mg/vial    315-22-0    單響尾蛇毒蛋白    Monocrotalin
HPLC≥98%，20mg/vial    55750-84-0    西紅花苷II    Crocin?II
HPLC≥97%，20mg/vial    94238-00-3    梔子黃色素    Gardenia yellow pigment
Standard，20mg/vial    42553-65-1    西紅花苷    Crocin
HPLC≥98%，20mg/vial    91-64-5        Coumarin
HPLC≥98%，20mg/vial    553-21-9    木香烴內(nèi)酯    Costunolide
HPLC≥98%，20mg/vial    13063-54-2    D-四氫藥根堿    D- four?hydrogen?jatrorrhizine
HPLC≥98%，20mg/vial    630-94-4、51014-29-0    去氫鉤藤堿    Corynoxeine
HPLC≥98%，20mg/vial    18797-79-0    紫堇醇靈堿    Corydalis?alcohol?spirit alkali
NADP-蘋果酸脫氫酶（NADP-MDH）測(cè)試盒100管/96樣規(guī)格HPLC≥98%，20mg/vial    4547-24-4    科羅索酸    Corosolic acid
HPLC≥98%，20mg/vial    1198398-71-8    硫酸黃連堿    Huang Lianjian sulfate
HPLC≥98%，20mg/vial    6020-18-4    氯化黃連堿    Huang Lianjian?chloride
HPLC≥98%，20mg/vial    3486-66-6    硫酸黃連堿    Huang Lianjian sulfate
HPLC≥98%，20mg/vial    146501-37-3    沙苑子苷A    Complanatoside?A