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更新時間:2017-07-13 22:22:03瀏覽次數(shù):143次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)我公司提供的線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶測試盒100管/48樣方法分類:紫外分光光度法、可見分光光度法、微量法、酶法、高效液相色譜法本方法提供代測服務(wù)!咨詢!
產(chǎn)品名稱:線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶測試盒100管/48樣規(guī)格
規(guī)格:100管/48樣 測試方法:微量法
測定意義:
線粒體復(fù)合體Ⅴ又稱F1F0-ATP合酶,廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中,由F1和F0兩個亞單位組成。該酶利用呼吸鏈產(chǎn)生的質(zhì)子電化學(xué)梯度催化ATP合成,也可逆過程水解ATP。此外,復(fù)合體Ⅴ還存在于葉綠體、異養(yǎng)菌和光合細(xì)菌中。復(fù)合體Ⅴ是線粒體氧化磷酸化和葉綠體光合磷酸化合成ATP的關(guān)鍵酶。
測定原理:
復(fù)合體Ⅴ水解ATP產(chǎn)生ADP和Pi,通過測定Pi增加速率來測定復(fù)合體Ⅴ活性。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶測試盒100管/48樣成及試劑配制
1:預(yù)包被板: 96T/48T
2:酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1
3:標(biāo)準(zhǔn)品: -6 0.5mL x 2
4:EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5:標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6:顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7:終止液: 1N 12mL x 1
8:濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶測試盒100管/48樣注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與Z后一孔間的時間間隔過大,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,從而影響 實驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個標(biāo)本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶測試盒100管/48樣操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。 7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。
DL-Alanine 其他英文名稱: DL-α-Alanine;DL-2-Amino propanic acid;DL-α-Amino propanic acid;(±)-2-Aminopropionic acid 產(chǎn)品規(guī)格: BR,98.5% 包裝:25克/100克/500克號:302-72-7C3H7NO2=89.10級別:BR含量:≥98.5%PH(5%水溶液):5.5~7.0干燥失重:≤0.20%重金屬:≤0.001%灼燒殘渣:≤0.10%氯化物:≤0.02%硫酸鹽:≤0.02%銨鹽:≤0.02%砷鹽:≤0.0001%鐵鹽:≤0.002%性狀:結(jié)晶粉末。有甜味,味覺值0.06%。200℃升華,264~269℃分解。并隨加熱速度而不同。易溶于熱水,溶于水,微溶于乙醇;由水-乙醇液重結(jié)晶者為斜方晶體系,由水重結(jié)晶者為針狀結(jié)晶或結(jié)晶性粉末。10%水溶液的PH值5.5-7.0,約于295-300℃熔化并分解,化學(xué)性能穩(wěn)定,遇亞硝酸可轉(zhuǎn)變?yōu)長-乳酸。易溶于水(16.72g/100ml,25 oC)。微溶于乙醇,無旋光性用途:生化研究。有機微量分析測定氮和氨基氮的標(biāo)準(zhǔn)樣品,肝功能試驗中測定谷一丙轉(zhuǎn)氨酶活力保存:RTβ-*/3-氨基丙酸/β-初油氨基酸/β-絲析氨酸/β-氨基丙酸/β-Alanine 10克 A0004 ,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, BR,98% 107-95-9 RT 100克 ,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 1公斤 ,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,中20mg/支;HPLC≥98% 異嗪皮啶 Isofraxidin
20mg/支 異牡荊素 Isovitexin
HPLC≥98%,200mg/支 L-異* L- isoleucine
HPLC≥98%,20mg/支 異茴芹內(nèi)酯 Isopimpinellin
HPLC≥98%;20mg/支 異佛手柑內(nèi)酯 Isobergapten
HPLC≥98%;20mg/支 異補骨脂查爾酮 Isopsoralen?chalcone
HPLC≥98%;20mg/支 異補骨脂二氫黃酮 Isopsoralen?two hydrogen?flavones
HPLC≥98%;20mg/支 野黃芩素 Scularin
HPLC≥98%,20mg/支 氧化前胡素 Oxidation of?the former Hu Su
HPLC≥98%;20mg/支 新補骨脂異黃酮 Neobavaisoflavone
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶測試盒100管/48樣200mg/支 L-* L-?valine
20mg/支 腺苷 Adenosine
20mg/支 *1 Vitamin K1
20mg/支;HPLC≥99% * Vitamin E
20mg/支;HPLC≥99% *3 Vitamin D3
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