Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；HCT116-Cas9-565

公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞銷售的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè)，主要擁有復(fù)蘇及凍存細(xì)胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù)，公司主要為細(xì)胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；HCT116-Cas9-565技術(shù)培訓(xùn)、售后服務(wù)，其細(xì)胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細(xì)胞庫，以及部分國內(nèi)外細(xì)胞研究機(jī)構(gòu)建系。

細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；HCT116-Cas9-565
形態(tài)特性  上皮樣；多角
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使HCT116細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Puromycin，經(jīng)2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。 
培養(yǎng)條件  IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium  10%FBS；2ug/ml Puromycin
傳代方法  1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：7,10；D12S391：17,20；D13S317：10,13；D16S539：11,14；D18S51：17,18；D19S433：12,12；D21S11：29,30；D2S1338：16,16；D3S1358：12,17；D5S818：10,11；D6S1043：14,14；D7S820：11,12；D8S1179：12,14；FGA：18,23；Penta E：13,14；TH01：8,9；TPOX：8,8；vWA：18,22；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；HCT116-Cas9-565處理方法
1、用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的）培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基，若出現(xiàn)渾濁情況，請及時(shí)。
3、將細(xì)胞置于顯微鏡下觀察，如有污染，請及時(shí)。
4、嚴(yán)格無菌操作，拆下封口膜，如果細(xì)胞的量較少，可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞量足夠，可進(jìn)行離心收集細(xì)胞，用1×PBS洗兩遍，加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃，5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞密度達(dá)到80%以上或存在成團(tuán)現(xiàn)象，建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細(xì)胞為凍存狀態(tài)，可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時(shí)搖動，盡快解凍。解凍后，用75%酒精將凍存管擦拭干凈，用吸管吸出細(xì)胞懸液，放入培養(yǎng)瓶中，再加入相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液，放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)知識：
1.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染？
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí)，應(yīng)如何處理？
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少， 大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性 損傷， 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳， 常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？
冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。緩激肽(BK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)白介素27w(IL27w)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Bradykinin (BK)48T/96T
纖維蛋白原β(FGβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)白介素27w(IL27w)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Fibrinogen Beta (FGb)48T/96T
松弛肽(RLN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GMCSF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Relaxin (RLN)48T/96T
TGFβ誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1(TIEG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GMCSF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for TGF Beta Inducible Early Response Gene 1 (TIEG1)48T/96T
激素脫落酸(ABA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GMCSF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)GeneralELISA Kit for Abscisic Acid (ABA)48T/96T
胎盤堿性磷酸酶(ALPP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)肝細(xì)胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Alkaline Phosphatase, Placeal (ALPP)48T/96T
接觸蛋白關(guān)聯(lián)蛋白樣蛋白4(CNAP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)肝細(xì)胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Coactin Associated Protein Like Protein 4 (CNAP4)48T/96T
糖抗原50(CA50)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)肝細(xì)胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Carbohydrate Aigen 50 (CA50)48T/96T
突觸核蛋白α(SNCα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)肝細(xì)胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Synuclein Alpha (SNCa)48T/96T
神經(jīng)細(xì)胞黏附分子(NCAM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)肝細(xì)胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Neural Cell Adhesion Molecule (NCAM)48T/96T
抗補(bǔ)體1q抗體(Ai-C1q)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Ai-Compleme 1q Aibody (Ai-C1q)48T/96T
胃泌素(GT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Gastrin (GT)48T/96T
毒蕈堿型*受體M4(CHRM4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Muscarinic 4 (CHRM4)48T/96T
MAX基因關(guān)聯(lián)蛋白A(MgA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for MAX Gene Associated Protein (MgA)48T/96T
細(xì)胞毒性T-淋巴細(xì)胞關(guān)聯(lián)抗原4(CTLA4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Cytotoxic T-Lymphocyte Associated Aigen 4 (CTLA4)48T/96T
角蛋白18(KRT18)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Keratin 18 (KRT18)48T/96T
細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白(MEPE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Matrix Extracellular Phosphoglycoprotein (MEPE)48T/96T
周期素依賴性激酶4(CDK4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)粒細(xì)胞集落刺激因子(GCSF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Cyclin Depende Kinase 4 (CDK4)48T/96T
殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)粒細(xì)胞集落刺激因子(GCSF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Bactericidal/Permeability Increasing Protein (BPI)48T/96T
毒蕈堿型*受體M5(CHRM5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)粒細(xì)胞集落刺激因子(GCSF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Muscarinic 5 (CHRM5)48T/96T
纖溶酶原(Plg)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)膠質(zhì)細(xì)胞系來源神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Plasminogen (Plg)48T/96T
纖維蛋白肽A(FPA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)膠質(zhì)細(xì)胞系來源神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit