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更新時間:2017-06-05 15:16:26瀏覽次數(shù):88次
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公司專注于細胞培養(yǎng)及細胞銷售的細胞生物學技術研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復蘇及凍存細胞及相關技術服務,公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-556技術培訓、售后服務,其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內(nèi)外細胞研究機構建系。
細胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-556
形態(tài)特性 上皮樣;多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 1:2~1:4傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,12;D12S391:22,22;D13S317:11,11;D16S539:11,11;D18S51:12,12;D19S433:11,16;D21S11:28,28;D2S1338:23,24;D3S1358:17,17;D5S818:11,13;D6S1043:11,12;D7S820:8,10;D8S1179:14,15;FGA:21,21;;Penta E:7,14;TH01:7,8;TPOX:8,11;vWA:15,15;
同工酶
染色體
使用權限 A類
Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-556處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞密度達到80%以上或存在成團現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應的細胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)知識:
1.應如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。前列腺素F受體(FP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)腦型肌酸激酶(CKB)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Prostaglandin F Receptor (FP)48T/96T
α-黑色素細胞刺激素(αMSH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)磷脂酶D(PLD)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Alpha-Melanocyte Stimulating Hormone (aMSH)48T/96T
雄烯二醇(AED)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)GeneralELISA Kit for Androstenediol (AED)48T/96T
對氧磷酶1(PON1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Paraoxonase 1 (PON1)48T/96T
胱天蛋白酶2(P2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Caspase 2 (P2)48T/96T
著絲粒蛋白E(CENPE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Ceromere Protein E (CENPE)48T/96T
甘膽酸(CG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Cholyglycine (CG)48T/96T
肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Heparin Cofactor II (HCII)48T/96T
高鐵血紅蛋白還原酶(MHBR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)賴氨酰氧化酶(LOX)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Methemoglobin Reductase (MHBR)48T/96T
*脫氫酶(GDH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)組織轉*酶(TGM2)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Glutamate Dehydrogenase 1 (GDH)48T/96T
*(GSH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)RAS癌基因家族成員RAB5A(RAB5A)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)GeneralELISA Kit for Glutathione (GSH)48T/96T
*過氧化酶1(GPX1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鋅結合α2-糖蛋白1(αZGP1)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 1 (GPX1)48T/96T
乳過氧化物酶(LPO)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)白介素6(IL6)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Lactoperoxidase (LPO)48T/96T
核糖核酸酶A(RNASE1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)半乳糖苷酶α(GLα)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-556分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Ribonuclease A (RNASE1)48T/96T
甲狀腺結合球蛋白(TBG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)組蛋白H2A(H2A)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Thyroxine Binding Globulin (TBG)48T/96T
降鈣素原(PCT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)乳過氧化物酶(LPO)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Procalcitonin (PCT)48T/96T
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