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更新時(shí)間:2017-06-05 15:16:26瀏覽次數(shù):85次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤;U-87 MG U87MG;U87 MG
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-15 HCT15
公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞銷售的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復(fù)蘇及凍存細(xì)胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細(xì)胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞;PANC-1-Cas9-556技術(shù)培訓(xùn)、售后服務(wù),其細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細(xì)胞庫(kù),以及部分國(guó)內(nèi)外細(xì)胞研究機(jī)構(gòu)建系。
細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞;PANC-1-Cas9-556
形態(tài)特性 上皮樣;多角形
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 1:2~1:4傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,12;D12S391:22,22;D13S317:11,11;D16S539:11,11;D18S51:12,12;D19S433:11,16;D21S11:28,28;D2S1338:23,24;D3S1358:17,17;D5S818:11,13;D6S1043:11,12;D7S820:8,10;D8S1179:14,15;FGA:21,21;;Penta E:7,14;TH01:7,8;TPOX:8,11;vWA:15,15;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞;PANC-1-Cas9-556處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過(guò)滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請(qǐng)及時(shí)。
3、將細(xì)胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請(qǐng)及時(shí)。
4、嚴(yán)格無(wú)菌操作,拆下封口膜,如果細(xì)胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞量足夠,可進(jìn)行離心收集細(xì)胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞密度達(dá)到80%以上或存在成團(tuán)現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細(xì)胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細(xì)胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)知識(shí):
1.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購(gòu)買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少, 大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性 損傷, 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購(gòu)買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳, 常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。前列腺素F受體(FP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)腦型肌酸激酶(CKB)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Prostaglandin F Receptor (FP)48T/96T
α-黑色素細(xì)胞刺激素(αMSH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)磷脂酶D(PLD)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Alpha-Melanocyte Stimulating Hormone (aMSH)48T/96T
雄烯二醇(AED)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)GeneralELISA Kit for Androstenediol (AED)48T/96T
對(duì)氧磷酶1(PON1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Paraoxonase 1 (PON1)48T/96T
胱天蛋白酶2(P2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Caspase 2 (P2)48T/96T
著絲粒蛋白E(CENPE)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Ceromere Protein E (CENPE)48T/96T
甘膽酸(CG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Cholyglycine (CG)48T/96T
肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Heparin Cofactor II (HCII)48T/96T
高鐵血紅蛋白還原酶(MHBR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)賴氨酰氧化酶(LOX)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Methemoglobin Reductase (MHBR)48T/96T
*脫氫酶(GDH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)組織轉(zhuǎn)*酶(TGM2)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Glutamate Dehydrogenase 1 (GDH)48T/96T
*(GSH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)RAS癌基因家族成員RAB5A(RAB5A)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)GeneralELISA Kit for Glutathione (GSH)48T/96T
*過(guò)氧化酶1(GPX1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鋅結(jié)合α2-糖蛋白1(αZGP1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 1 (GPX1)48T/96T
乳過(guò)氧化物酶(LPO)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)白介素6(IL6)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Lactoperoxidase (LPO)48T/96T
核糖核酸酶A(RNASE1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)半乳糖苷酶α(GLα)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞;PANC-1-Cas9-556分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Ribonuclease A (RNASE1)48T/96T
甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)組蛋白H2A(H2A)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Thyroxine Binding Globulin (TBG)48T/96T
降鈣素原(PCT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)乳過(guò)氧化物酶(LPO)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Procalcitonin (PCT)48T/96T
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