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更新時(shí)間:2017-06-05 15:15:02瀏覽次數(shù):170次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤;U-87 MG U87MG;U87 MG
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-15 HCT15
公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞銷售的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復(fù)蘇及凍存細(xì)胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細(xì)胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞;PANC-1-Cas9-554技術(shù)培訓(xùn)、售后服務(wù),其細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細(xì)胞庫(kù),以及部分國(guó)內(nèi)外細(xì)胞研究機(jī)構(gòu)建系。
細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞;PANC-1-Cas9-554
形態(tài)特性 上皮樣;多角形
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 1:2~1:4傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,12;D12S391:22,22;D13S317:11,11;D16S539:11,11;D18S51:12,12;D19S433:11,16;D21S11:28,28;D2S1338:23,24;D3S1358:17,17;D5S818:11,13;D6S1043:11,12;D7S820:8,10;D8S1179:14,15;FGA:21,21;;Penta E:7,14;TH01:7,8;TPOX:8,11;vWA:15,15;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞;PANC-1-Cas9-554處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過(guò)滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請(qǐng)及時(shí)。
3、將細(xì)胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請(qǐng)及時(shí)。
4、嚴(yán)格無(wú)菌操作,拆下封口膜,如果細(xì)胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞量足夠,可進(jìn)行離心收集細(xì)胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞密度達(dá)到80%以上或存在成團(tuán)現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細(xì)胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細(xì)胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)知識(shí):
1.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購(gòu)買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少, 大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性 損傷, 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購(gòu)買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳, 常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。(Rat)ELISA Kit for Protein Ieracting With Protein Kinase C Alpha 1 (PICK1)48T/96T
蛋白激酶Cα相互作用蛋白1(PICK1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Bcl2/腺病毒E1B相互作用蛋白3(BNIP3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Protein Ieracting With Protein Kinase C Alpha 1 (PICK1)48T/96T
基質(zhì)金屬蛋白酶23B(MMP23B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)骨成型蛋白4(BMP4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 23B (MMP23B)48T/96T
基質(zhì)金屬蛋白酶23B(MMP23B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)骨成型蛋白4(BMP4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 23B (MMP23B)48T/96T
間隙連接蛋白26(CX26)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)骨成型蛋白4(BMP4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Connexin 26 (CX26)48T/96T
堿性磷酸酶(ALP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)骨成型蛋白4(BMP4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Alkaline Phosphatase (ALP)48T/96T
加溶金屬蛋白酶1(MP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)骨成型蛋白4(BMP4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Pitrilysin Metalloproteinase 1 (MP1)48T/96T
基質(zhì)Gla蛋白(MGP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)骨成型蛋白4(BMP4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Matrix Gla Protein (MGP)48T/96T
破骨細(xì)胞刺激因子1(OSF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)骨成型蛋白4(BMP4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Osteoclast Stimulating Factor 1 (OSF)48T/96T
肝素結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子(HBEGF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)骨成型蛋白4(BMP4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Heparin Binding Epidermal Growth Factor Like Growth Factor (HBEGF)48T/96T
饑餓素(GHRL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)信號(hào)素3A(SEMA3A)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞;PANC-1-Cas9-554法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Ghrelin (GHRL)48T/96T
饑餓素(GHRL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)*/*激酶39(STK39)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Ghrelin (GHRL)48T/96T
饑餓素(GHRL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)生長(zhǎng)激素(GH)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Ghrelin (GHRL)
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