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Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人癌細(xì)胞;MCF7-Cas9-544

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公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞銷售的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復(fù)蘇及凍存細(xì)胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細(xì)胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人癌細(xì)胞;MCF7-Cas9-544技術(shù)培訓(xùn)、售后服務(wù),其細(xì)胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細(xì)胞庫,以及部分國內(nèi)外細(xì)胞研究機(jī)構(gòu)建系。
細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人癌細(xì)胞;MCF7-Cas9-544
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使MCF7細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Puromycin,經(jīng)2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS;2ug/ml Puromycin
傳代方法  1:3~1:6傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR  Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,10;D12S391:18,20;D13S317:11,11;D16S539:11,12;D18S51:14,14;D19S433:13,14;D21S11:30,30;D2S1338:21,23;D3S1358:16,16;D5S818:11,12;D6S1043:12,18;D7S820:8,9;D8S1179:10,14;FGA:23,25;Penta E:7,12;TH01:6,6;TPOX:9,12;vWA:14,15
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人癌細(xì)胞;MCF7-Cas9-544處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時(shí)。
3、將細(xì)胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時(shí)。
4、嚴(yán)格無菌操作,拆下封口膜,如果細(xì)胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞量足夠,可進(jìn)行離心收集細(xì)胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞密度達(dá)到80%以上或存在成團(tuán)現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細(xì)胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細(xì)胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)知識(shí):
1.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少, 大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性 損傷, 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。磷脂酰肌醇特異性磷酯酶Cβ3(PLCβ3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Phospholipase C Beta 3, Phosphoinositide Specific (PLCb3)48T/96T
糖磷脂酰肌醇(GPI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Glycophosphatidylinositol (GPI)48T/96T
胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Breast And Kidney Expressed Chemokine (BRAK)48T/96T
皮膚T-細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Cutaneous T-Cell Attracting Chemokine (CTACK)48T/96T
D-二聚體(D2D)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Oryctolagus cuniculus (Rabbit)ELISA Kit for D-Dimer (D2D)48T/96T
抑制素βC(INHβC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Inhibin Beta C (INHbC)48T/96T
Endoglin蛋白(ENG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Endoglin (ENG)48T/96T
肝脂酶(LIPC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Lipase, Hepatic (LIPC)48T/96T
肝脂酶(LIPC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Lipase, Hepatic (LIPC)48T/96T
肝脂酶(LIPC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Lipase, Hepatic (LIPC)48T/96T
鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱγ(CAMK2γ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Calcium/Calmodulin Depende Protein Kinase II Gamma (CAMK2g)48T/96T
血管細(xì)胞粘附分子1(VCAM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Rhesus monkey (Simian)ELISA Kit for Vascular Cell Adhesion Molecule 1 (VCAM1)48T/96T
腫瘤壞死因子α(TNFα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Rhesus monkey (Simian)ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa)48T/96T
干擾素α(IFNα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Rhesus monkey (Simian)ELISA Kit for Ierferon Alpha (IFNa)48T/96T
α-內(nèi)啡肽(αEP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Alpha-Endorphin (aEP)48T/96T
單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Rhesus monkey (Simian)ELISA Kit for Monocyte Chemotactic Protein 1 (MCP1)48T/96T
巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Rhesus monkey (Simian)ELISA Kit for Macrophage Migration Inhibitory Factor (MIF)48T/96T
胰島素(INS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Rhesus monkey (Simian)ELISA Kit for Insulin (INS)48T/96T
金屬硫蛋白1(MT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Bos taurus; Bovine (Cattle)ELISA Kit for Metallothionein 1 (MT1)48T/96T
干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Rhesus monkey (Simian)ELISA Kit for Ierferon Gamma (IFNg)48T/96T
白介素6(IL6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Rhesus monkey (Simian)ELISA Kit for Ierleukin 6 (IL6)48T/96T

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