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SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細胞;PUMC-HUVEC-T1培養(yǎng)

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更新時間:2017-06-02 15:13:02瀏覽次數(shù):144次

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SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細胞;PUMC-HUVEC-T1培養(yǎng)
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技術(shù)培訓、售后服務(wù),其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內(nèi)外細胞研究機構(gòu)建系。
細胞名稱 SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細胞;PUMC-HUVEC-T1培養(yǎng)
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  PUMC-HUVEC-T1形態(tài)呈現(xiàn)為典型的鵝卵石樣排列,已證明在體外可傳至40代。PUMC-HUVEC-T1內(nèi)皮標記vWF、CD31、CD34均陽性,可結(jié)合凝集素,電鏡下可見緊密連接和W-P小體,Matrigle上可形成管型。不同代數(shù)的HUVEC-T1細胞核型正常穩(wěn)定(P12、P13、P19、P38),裸鼠體內(nèi)接種不成瘤(P9和P33)。
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS 40μU/L胰島素 + 40U/ml 肝素 + 1% NEAA
傳代方法  1:3~1:4傳代,一周1~2次
傳代情況 P12
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR  Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:11,13;D16S539:9,12;D18S51:16,17;D21S11:28,30;D2S1338:17,19;D3S1358:15,17;D5S818:11,13;D6S1043:11,14;D7S820:8,11;D8S1179:13,14;FGA:24;Penta E:15,17;vWA:14,16;
同工酶
染色體  46,XX
使用權(quán)限 A類
SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細胞;PUMC-HUVEC-T1培養(yǎng)
處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞密度達到80%以上或存在成團現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)知識:
1.應(yīng)如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
鞘磷脂合酶1(SGMS1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Sphingomyelin Synthase 1 (SGMS1)48T/96T
5-羥色胺受體4(HTR4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for 5-Hydroxytryptamine Receptor 4 (HTR4)48T/96T
5-羥色胺受體6(HTR6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for 5-Hydroxytryptamine Receptor 6 (HTR6)48T/96T
乙酰復合胺-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(ASMT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Acetylserotonin-O-Methyltransferase (ASMT)48T/96T
5-羥色胺受體7(HTR7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for 5-Hydroxytryptamine Receptor 7 (HTR7)48T/96T
載脂蛋白L2(APOL2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Apolipoprotein L2 (APOL2)48T/96T
載脂蛋白L3(APOL3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Apolipoprotein L3 (APOL3)48T/96T
前列腺素還原酶1(PTGR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Prostaglandin Reductase 1 (PTGR1)48T/96T
前列腺素還原酶2(PTGR2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Prostaglandin Reductase 2 (PTGR2)48T/96T
全羧酶合成酶(HLCS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Holocarboxylase Synthetase (HLCS)48T/96T
甾醇-O-酰基轉(zhuǎn)移酶1(SOAT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Sterol-O-Acyltransferase 1 (SOAT1)48T/96T
二磷酸甘油酸變位酶(BPGM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Bisphosphoglycerate Mutase (BPGM)48T/96T
磷脂酰肌醇蛋白聚糖5(GPC5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Glypican 5 (GPC5)48T/96T
谷光甘肽合成酶(GSS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Glutathione Synthetase (GSS)48T/96T
角蛋白6C(KRT6C)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Keratin 6C (KRT6C)48T/96T
犬尿氨酸酶(KYNU)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Kynureninase (KYNU)48T/96T
*加壓素原(VP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Preprovasopressin (VP)48T/96T
前催產(chǎn)素原(OT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Preprooxytocin (OT)48T/96T
脫氧胸苷酸激酶(DTYMK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Deoxythymidylate Kinase (DTYMK)48T/96T
類*δ1(TPSδ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Tryptase Delta 1 (TPSd1)48T/96T
類*γ1(TPSγ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Tryptase Gamma 1 (TPSg1)48T/96T
甘丙肽受體4(GALR4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Galanin Receptor 4 (GALR4)48T/96T
甘丙肽受體3(GALR3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Galanin Receptor 3 (GALR3)48T/96T
甘丙肽受體2(GALR2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Galanin Receptor 2 (GALR2)48T/96T
金屬硫蛋白1X(MT1X)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Metallothionein 1X (MT1X)48T/96T
金屬硫蛋白1H(MT1H)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Metallothionein 1H (MT1H)48T/96T
金屬硫蛋白1F(MT1F)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Metallothionein 1F (MT1F)48T/96T
金屬硫蛋白1G(MT1G)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Metallothionein 1G (MT1G)48T/96T
金屬硫蛋白1B(MT1B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Metallothionein 1B (MT1B)48T/96T
拓撲異構(gòu)酶Ⅲ(TOP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Topoisomerase III (TOP3)48T/96T
血小板反應(yīng)蛋白3(THBS3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Thrombospondin 3 (THBS3)48T/96T
滑行蛋白β(TXLNβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Taxilin Beta (TXLNb)48T/96T
 

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