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人胚肺二倍體細胞;KMB-17實驗方法

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更新時間:2017-06-02 14:56:30瀏覽次數(shù):114次

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細胞名稱 人胚肺二倍體細胞;KMB-17實驗方法
形態(tài)特性  成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞系來自于一個4周齡女性胚胎的正常肺組織,于1975年在中國醫(yī)學(xué)*昆明醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所建立;可作為轉(zhuǎn)染宿主,用于肺損傷或分化的研究。
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)   15%NBS
傳代方法  1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 PN6
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR  -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類人胚肺二倍體細胞;KMB-17實驗方法處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞密度達到80%以上或存在成團現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
人胚肺二倍體細胞;KMB-17實驗方法細胞培養(yǎng)知識:
1.應(yīng)如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
旋轉(zhuǎn)蛋白(RTTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Rotatin (RTTN)48T/96T
濕結(jié)合蛋白(RTBDN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Retbindin (RTBDN)48T/96T
休眠蛋白(RSN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Restin (RSN)48T/96T
Repetin蛋白(RPTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Repetin (RPTN)48T/96T
RNA甲基轉(zhuǎn)移酶(RNMT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for RNA Methyltransferase (RNMT)48T/96T
核黃素激酶(RFK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Riboflavin Kinase (RFK)48T/96T
*飽和酶(RETSAT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Retinol Saturase (RETSAT)48T/96T
*脫氫酶12(RDH12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Retinol Dehydrogenase 12 (RDH12)48T/96T
*脫氫酶11(RDH11)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Retinol Dehydrogenase 11 (RDH11)48T/96T
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*脫氫酶8(RDH8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Retinol Dehydrogenase 8 (RDH8)48T/96T
*脫氫酶5(RDH5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Retinol Dehydrogenase 5 (RDH5)48T/96T
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網(wǎng)鈣蛋白1(RCN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Reticulocalbin 1 (RCN1)48T/96T
核糖激酶(RBKS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Ribokinase (RBKS)48T/96T
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多效調(diào)節(jié)因子1(PLRG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Pleiotropic Regulator 1 (PLRG1)48T/96T
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