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人肝細(xì)胞;HL-7702L-02實(shí)驗(yàn)方法

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人肝細(xì)胞;HL-7702[L-02]實(shí)驗(yàn)方法培養(yǎng)的前一周內(nèi)出現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題, 客戶可憑細(xì)胞的照片以及書面形式的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程提供給我公司。 經(jīng)公司技術(shù)人員核實(shí)認(rèn)定為可以予以重發(fā)的情況,由公司再免費(fèi)提供一次細(xì)胞。

公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞銷售的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復(fù)蘇及凍存細(xì)胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細(xì)胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、技術(shù)培訓(xùn)、人肝細(xì)胞;HL-7702[L-02]實(shí)驗(yàn)方法售后服務(wù),其細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細(xì)胞庫(kù),以及部分國(guó)內(nèi)外細(xì)胞研究機(jī)構(gòu)建系。
細(xì)胞名稱 人肝細(xì)胞;HL-7702[L-02]實(shí)驗(yàn)方法
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清,20%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN5
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類人肝細(xì)胞;HL-7702[L-02]實(shí)驗(yàn)方法處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過(guò)滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請(qǐng)及時(shí)。
3、將細(xì)胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請(qǐng)及時(shí)。
4、嚴(yán)格無(wú)菌操作,拆下封口膜,如果細(xì)胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞量足夠,可進(jìn)行離心收集細(xì)胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞密度達(dá)到80%以上或存在成團(tuán)現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細(xì)胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細(xì)胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
人肝細(xì)胞;HL-7702[L-02]實(shí)驗(yàn)方法細(xì)胞培養(yǎng)知識(shí):
1.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購(gòu)買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少, 大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性 損傷, 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購(gòu)買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
Anti-Apaf-1 凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端)  
Anti-APC 活化蛋白C抗體  
Anti-Apelin 脂肪炎癥因子Apelin抗體  
Anti-Apelin receptor/APJ receptor  Apelin receptor抗體  
Anti-APEX1/Ref-1 氧化還原因子1抗體  
Anti-ATH Ⅲ *Ⅲ抗體  
Anti-APG4B/AUTL1 APG4B細(xì)胞自噬相關(guān)抗體  
Anti-APNG/MPG N-甲基嘌呤DNA糖基化酶  
Anti-ApoH 載脂蛋白H抗體  
Anti-Apo J/Clusterin-α/β/Apolipoprotein J 凝聚素α/β抗體  
Anti-Apollon Apollon凋亡抑制蛋白抗體  
Anti-APP/Amyloid beta A4 APP淀粉樣肽前體蛋白抗體  
Anti-phospho-APP 磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體  
Anti-APPL1 銜接因子蛋白含pH域磷酸*結(jié)合域和*拉鏈基元1抗體  
Anti-AQP1 水通道蛋白-1抗體  
Anti-AQP5 水通道蛋白-5抗體  
Anti-AQP9 水通道蛋白-9抗體  
Anti-phospho-AR 磷酸化雄激素受體抗體   
Anti-AKR1B1/ADR 醛糖還原酶抗體  
Anti-Arfaptin 1 ADP核糖基化因子相互作用蛋白1抗體  
Anti-ARFIP2/arfaptin 2 ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體  
Anti-Aromatase  芳香化酶抗體  
Anti-β-arrestin 1 β-抑制蛋白1抗體  
Anti-β-arrestin 2 β-抑制蛋白2抗體  
Anti-ART Artemin抗體  
Anti-ASPP2 P53凋亡刺激蛋白2抗體  
Anti-Ang I/AT1 血管緊張素I抗體  
Anti-phospho-ATF2 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體  
Anti-ATG7 自噬相關(guān)蛋白7抗體  
Anti-ATF4 活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體  
Anti-ATM 毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體  
Anti-ATP2c1/Ca++ ATPase 鈣離子ATP酶通道蛋白抗體  
Anti-ATF6 活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體  
Anti-ATP4B/H+K+ ATPase 氫鉀ATP酶通道蛋白抗體  
人肝細(xì)胞;HL-7702[L-02]實(shí)驗(yàn)方法Anti-ATP5j ATP合成酶H+轉(zhuǎn)運(yùn)線粒體F0復(fù)合體亞基F6抗體  
Anti-ATP7A 銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)α鏈抗體  
Anti-ATRN 吸引素抗體  
Anti-ATP7B 銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)β鏈抗體  
Anti-ATP1b2/Na+K+ ATPase 鈉鉀ATP酶通道蛋白抗體  
Anti-AVEN 凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑抗體  
Anti-ATP-sensitive K+ channel subunit Kir6.2 ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗體  
Anti-AVPR2 *加壓素受體2抗體  
Anti-Bdkrb2/B2R 緩激肽B2受體抗體  
Anti-Axin1 軸蛋白1Axin protein 1抗體  
 Anei-ATX/Autotaxin/E-NPP2 自分泌運(yùn)動(dòng)因子抗體  
Anti-Aurora B 極光激酶B抗體  
Anti-B7-DC/PDL2/CD273 程序性死亡配體2抗體  
Anti-phospho-BAD 磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體  
Anti-Batroxobin 蛇毒巴曲酶抗體  
Anti-Bax  Bax(小鼠來(lái)源抗體)  
Anti-Bcl-xL Bcl-xL蛋白抗體  
Anti-BBC3/PUMA p53正向細(xì)胞凋亡調(diào)控因子抗體  
Anti-phospho-Bcl-xL 抗磷酸化Bcl-xL(pSer62)蛋白抗體  
Anti-BCHENT 丁酰*脂酶抗體(N端)  
Anti-BCHE 抗丁酰*脂酶單克隆抗體  
Anti-BCHECT 丁酰*脂酶抗體(C端)  
Anti-BECN1 一種抑癌基因抗體  
Anti-Beta-casein β-酪蛋白(抗體)兔抗山羊、綿羊  
Anti-BAFF/CD257 TNF家族B細(xì)胞激活因子抗體  
Anti-BIN1 橋連整合因子蛋白抗體  
Anti-Bim 細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體  
Anti-BMP4 骨形態(tài)發(fā)生蛋白4抗體  
Anti-BMPR-1A 骨成型蛋白受體1A抗體  
Anti-BNP 腦鈉素/利鈉肽抗體   
Anti-B Raf B Raf抗體  
Anti-BRCA1癌易感基因1抗體(人)  
Anti-BrdU 溴脫氧尿苷單克隆抗體  
 

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