蝦肝腸微胞蟲探針法熒光定量PCR試劑盒數(shù)據(jù)處理

1. 如果把本試劑盒用于定量檢測，則以陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品的 Ct 值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上推算出樣品RNA 濃度的 log 值，再推算出其濃度。

2. 如果把本試劑盒用于定性檢測，只判斷陽性或陰性，則陰性對照 Ct 必須大于或等于 40。陽性對照必須有熒光對數(shù)增長，有典型擴(kuò)增曲線，Ct 值應(yīng)該小于或等于 30。對待測樣品，如果其 Ct 大于或等于 40 則為陰性，如果小于或等于 35 則為陽性。如果在 35-40 之間，則重復(fù)一次。重復(fù)實(shí)驗(yàn)的 Ct值如果大于或等于 40 則為陰性，如果小于 35，則為陽性。

注意事項(xiàng)：
建議加樣順序是陰性質(zhì)控品、待檢樣本、陽性質(zhì)控品。4. PCR擴(kuò)增（擴(kuò)增區(qū)）
1)     儀器設(shè)置（以ABI Prism 7500為例）
將PCR反應(yīng)管放入PCR儀內(nèi)，按照對應(yīng)順序設(shè)置陰性質(zhì)控品(NTC)、陽性質(zhì)控品(Standard)及待檢樣本(Unknown)。Reporter Dye為FAM，Quencher Dye為None，參比染料(Passive Reference)為None。
2 ）   擴(kuò)增程序