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其它elisa免疫檢測試劑盒試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在科研上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,ELISA試劑盒如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
具體請參照:
試劑使用中的準(zhǔn)備工作及注意事項:
試劑盒中會有提示,一般需要準(zhǔn)備的有:
洗滌液;用前配制;有的試劑盒會標(biāo)明,配好的4度下一般可以放一個月;如果沒有標(biāo)明,盡量用新鮮的,不要多配制。
顯色液(有A液和B液的),用前15分鐘配制;
標(biāo)準(zhǔn)品:有的試劑盒中標(biāo)準(zhǔn)品是已經(jīng)配制好的,4度保存;有的是要現(xiàn)配制的;按照說明書操作;
濃縮*結(jié)合的二抗和HRP:如果需要配制,試劑盒沒注明配好可以保存多久的話,盡量現(xiàn)配現(xiàn)用(用前15分鐘配制);
原則是:試劑盒上沒有指出配制物的儲藏方式的話,應(yīng)該現(xiàn)配現(xiàn)用;不要怕麻煩;還有小瓶的管子開蓋前要離心,以免蓋子上粘連以后總量不夠。
加 樣:室溫溫育的試劑,特別是溫育時間比較短的實驗操作的試劑,加樣對數(shù)據(jù)的影響比較大,特別要注意加樣問題。
不好的操作原因:
不會正確使用加樣器;
血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣;
其它elisa免疫檢測試劑盒手工操作中,加樣板過多造成加樣後放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
兔抗抑癌基因p16IgG 大鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)
兔抗增值細胞核抗原IgG 大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒胞質(zhì)IgG(MPO-ANCA IgG)
兔抗植物蛋白AHA3(擬南芥)IgG 大鼠髓過氧化物酶(MPO)
兔抗組織蛋白酶BIgG 大鼠酸性成纖維生長因子1(aFGF-1)
退行性精母細胞同源物1IgG 大鼠*/*蛋白磷酸酶(STK)
褪黑素受體1A/松果體素受體1AIgG 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)
褪黑素受體1BIgG 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)
脫碘酶2IgG 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)
脫羧酶蛋白體36IgG 大鼠水通道蛋白2(AQP-2)
脫羧酶蛋白體36IgG 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)
拓普西異構(gòu)酶ⅠIgG 大鼠水通道蛋白0(AQP-0)
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