當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>技術(shù)文章>>怎樣避免人elisa免疫檢測試劑盒實驗中的過失?
人elisa免疫檢測試劑盒操作步驟多,新手操作難免會有過失。而這些過失很多是由細(xì)節(jié)不夠好造成的,減少過失的方法有很多,比如做實驗時少說話,防止唾液掉進酶標(biāo)條中。當(dāng)然,大家還要學(xué)會自己發(fā)掘問題,找出原因。那么我們要怎樣完善ELISA試劑盒實驗中的過失?
①:評估試劑的實用性,試劑的穩(wěn)定與否,對準(zhǔn)確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應(yīng)進行陰、陽對照及樣品反復(fù)比照試驗,判定試劑符合要求后方可使用。
②:操作前仔細(xì)閱讀說明書,嚴(yán)格按照說明書要求進行規(guī)范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進的地方,反復(fù)試驗確定成立后才能改進,比如洗板次數(shù)的掌握等。
③:加樣要準(zhǔn)確、快速。加樣不準(zhǔn)確,酶生成物的量不能確定,直接影響顯色結(jié)果。另外,顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān),所以加樣應(yīng)慎重。要求在一定時間內(nèi)加樣完畢的實驗,如果加樣遲緩,便出現(xiàn)誤差,而且試劑長時間暴露在外,尤其室溫過高時,保存期會縮短甚至失效。
④:檢驗技師應(yīng)具備從事實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗。能熟練操作實驗儀器、器械,具有一定總結(jié)和分析問題的能力,對實驗中出現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。
⑤:使用校對過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否對定量檢測尤為重要。
⑥:嚴(yán)格掌握顯色時間,顯色時間過短,加入終止液反應(yīng)終止后,底物結(jié)合物的量過少,易出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時間后顯色,應(yīng)判為假陽性,這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后立即顯色,不可報陽性,這可能是本底顯色的結(jié)果。
⑦:人elisa免疫檢測試劑盒洗滌*,洗板不*,酶結(jié)合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。另外,洗滌液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳舊的洗滌液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也可能出現(xiàn)假陽性。
⑧:嚴(yán)控反應(yīng)時間,反應(yīng)時間過長,酶失活;反應(yīng)時間過短,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合,生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假陰性。
250 PYG Broth Base 用于雙歧桿菌增菌培養(yǎng),使用時需加入氯化血紅素和*1(GB標(biāo)準(zhǔn)) PYG 液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)
250 Trypticase Soy-Yeast Extract Broth 用于單增李氏菌增菌培養(yǎng)(SN、GB標(biāo)準(zhǔn)) 胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯(TSB-YE)
10mg/支*5 每支添加于225ml HB4150、HB4192中(SN、GB標(biāo)準(zhǔn)) 萘啶酮酸
4.5mg*5 添加于225ml HB4160中制成LB1
4.0mg*5 添加于225ml HB4160中制成LB1
3.75mg/支*5 每支添加于225ml HB4150、HB4192中(SN、GB標(biāo)準(zhǔn)) 吖啶黃素
2.7mg*5 添加于225ml HB4160中制成LB1
5mg*5 添加于200ml HB4160中制成LB2
250 Trypticase Soy-Yeast Extract Agar 用于單增李氏菌的分純,培養(yǎng),可用于做7%羊血瓊脂(SN標(biāo)準(zhǔn)) 胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂(TSA-YE)
250 Modified Mcbride Agar Base 用于單增李氏菌選擇性分離(SN標(biāo)準(zhǔn)) 李氏菌選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)(MMA)
3mg/支*5 每支添加于 100ml HB4155 *
250 Bromcresol Purple Broth Base 適用于微生物檢驗中各種糖發(fā)酵實驗,無菌加入各種糖醇類物質(zhì)(SN標(biāo)準(zhǔn)) 糖發(fā)酵基礎(chǔ)肉湯
250 Listeria Enrichment Broth Base 添加奈啶酮酸,吖啶黃素,即為LB1,LB2,用于李氏菌二步增菌(GB標(biāo)準(zhǔn)) 李氏菌增菌肉湯(LB1,LB2)基礎(chǔ)
人elisa免疫檢測試劑盒
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