當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>技術文章>>人源細胞復蘇的操作步驟
人源細胞在實際操作中,凍存的細胞要進行復蘇,復蘇之后再培養(yǎng)傳代。復蘇細胞一般采用快速融化法。以保證細胞外結晶快速融化,以避免慢速融化水分滲入細胞內,再次形成胞內結晶損傷細胞。進行細胞復蘇的操作步驟如下:
(1)佩戴眼鏡和手套,從液氮罐中取出安瓿或冷凍管。
(2)迅速放入38℃水浴中,并不時搖動,在1分鐘內使其*融化,然后在無菌下取出細胞。
(3)在1000r/min速度下離心5~10分鐘,棄去上層液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,接種濃度1×109/L,置37℃溫箱靜置培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細胞密度較高,及時傳代?;驘o需離心直接將細胞加入瓶中,并加入培養(yǎng)基貼壁培養(yǎng)12~24小時后,充去上清,換入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
按照以上步驟復蘇的凍存人源細胞存活率高,生長及形態(tài)良好。
100923 1,2-dibutoxyethane 127-40-2 Diethylmalonylurea
100924 乙二醇二丁醚 fludrocortisone difluoroacetic acid
100925 112-48-1 氟氫可的松 difluoromethane
100926 1,10-Decanediol 127-31-1 Diheptyl sulfide
100927 1,10-癸二醇 2,2-Dichloropropionic acid sodium salt Dihydrokavain
100928 112-47-0 2,2-二氯丙酸鈉 dihydronicotinamide-adenine dinucleotide, disodium salt
100929 Undecylenic aldehyde 127-20-8 dihydroterpineol
100934 十一碳烯醛 N,N-Dimethylacetamide Diiodomethane 人源細胞
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