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中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(CHO)-化學(xué)試劑

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2017-07-26 12:43:26瀏覽次數(shù):292次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
產(chǎn)地 國(guó)產(chǎn) 加工定制
適用領(lǐng)域 科研    

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(CHO)是我公司重點(diǎn)推廣產(chǎn)品,我們有專業(yè)的技術(shù)人員全程指導(dǎo),請(qǐng)放心購(gòu)買,發(fā)貨時(shí)均會(huì)附上質(zhì)檢報(bào)告單、使用說(shuō)明書和*用法用量,提供正規(guī)發(fā)票。

詳細(xì)介紹

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(CHO)
細(xì)胞介紹:
1957 年從成年倉(cāng)鼠的活組織切片中建立。
細(xì)胞特性:
1來(lái)源:倉(cāng)鼠卵巢
2形態(tài) :成纖維細(xì)胞樣
3含量:>1x106個(gè)/mL
4污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5規(guī)格:T25 瓶或者 1mL凍存管包裝
細(xì)胞接受后 的處理:
1)收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2)請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉谩?br />中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(CHO)細(xì)胞用途:僅供科研使用。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一. 培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)DMEM 培養(yǎng)基(GIBCO,貨號(hào) 12800017,添加 NaHCO3 1.5g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞 處理 :
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并
檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
 

對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 2ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM 條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(CHO)注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們。
2. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

 

 

關(guān)鍵詞:顯微鏡 培養(yǎng)箱

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