上海機純實業(yè)有限公司
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產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
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更新時間:2017-07-25 11:40:20瀏覽次數(shù):160次
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產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 加工定制 | 是 |
---|---|---|---|
適用領(lǐng)域 | 科研 |
人皮膚黑色素瘤細胞(SK-MEL-1)是我公司重點推廣產(chǎn)品,我們有專業(yè)的技術(shù)人員全程指導(dǎo),請放心購買,發(fā)貨時均會附上質(zhì)檢報告單、使用說明書和*用法用量,提供正規(guī)發(fā)票。
人皮膚黑色素瘤細胞(SK-MEL-1)
細胞介紹:
該細胞由Oettgen F及其同事從一名29歲的患有廣泛、快速進展性惡性黑色素瘤 的白人男性患者的胸導(dǎo)管中分離建立的。該細胞可產(chǎn)生黑色素,電鏡檢測發(fā)現(xiàn)細胞中色素顆粒與自身合成和吞噬作用相關(guān)。在63%的惡性黑色素瘤患者和10%其他疾病患者體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了針對該細胞系的抗體。
細胞培養(yǎng)步驟:
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1.準備 MEM-EBSS 培養(yǎng)基(Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle ’ s Balanced Salts) (MEM-EBSS))( MEM,GIBCO,41500034,添加 EBSS),90%;優(yōu)質(zhì)
胎牛血清,10%
2.培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為95%。
3.凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細胞處理:
復(fù)蘇細胞:將含有l(wèi)mL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入l〇cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
人皮膚黑色素瘤細胞(SK-MEL-1)細胞傳代:
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加l-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO 后進行凍存。
注意事項:
收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
細胞特性:
1)來源:皮膚黑色素瘤
2)形態(tài):球形,懸浮生長
3)含量:>lxl06 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
人皮膚黑色素瘤細胞(SK-MEL-1)運輸和保存:可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細胞方式:(1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇;(2)存活細胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
細胞用途:僅供科研使用。
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