ELISA試劑盒常用的鹽析劑是硫酸銨，其溶解度大、價格便宜。硫酸銨沉積蛋白質的才能很強，其飽和溶液能使大多數的蛋白質沉積下來。對酶沒有損壞效果。
pH的操控：應從酶的溶解度與安穩(wěn)性兩個方面思考，在酶等電點時其溶解度zui小易沉積，但有些酶再等電點時安穩(wěn)性較差，因此要挑選pH值.通常請求在酶zui安穩(wěn)的pH值的前提下再思考酶沉積的pH值。在操作中一旦斷定pH值后，在增加硫酸銨之前甲酸或堿調理好酶液的pH值，要盡量避免溶液pH值的波動避免損壞酶的安穩(wěn)性。在增加硫酸銨時要留意拌和，并留意硫酸銨的參加速度，通常是由少到多，緩慢參加，硫酸銨盡可能磨成細粉。
溫度的操控：有些酶在較高溫度下安穩(wěn)性能較好，可在常溫下進行鹽析操作，而對于大多數酶，盡可能在低溫下操作。
酶液的凈置：加完硫酸銨后，酶液要靜置一段時間，使酶蛋白*沉積下來，酶靜置后，就不要再加以拌和。
有機溶劑挑選：可用于酶蛋白沉積的有機溶劑包含醇類物質等，如甲醇、乙醇、異丙醇。乙醇的親水性能較好，可防止蛋白質的變性，酶蛋白在其間的溶解度也較低。
有機溶劑沉積操作：有機溶劑通常都使蛋白質變性，當溫度較高時變性蛋白質分子就會成為持久失活。因此用有機溶劑處理時在0℃以下進行。用有機溶劑沉積得到的酶蛋白不要放置過久，要趕快加水溶解。
聚合物絮凝劑沉積 聚合物絮凝劑，如葡聚糖和聚乙二醇，與酶分子搶奪水分子，具有脫水效果使酶沉積。聚乙二醇作為一種沉積劑的長處是在水溶液中，其濃度可到達50%，濃度為6%-12%的蛋白質大都能夠沉積下來。這種試劑不需要低溫操作，而且對蛋白質的安穩(wěn)還有必定的維護效果。聚乙二醇不會被吸附，故在離子交換吸附前不必去掉。
酶和別的蛋白質都會構成金屬鹽，其溶解度較低。用金屬離子沉積的缺陷是酶與金屬離子相互效果后，可逆改變較差，尤其是用巰基衍生物，它的]金屬離子會催化酶變性而失活。
用*可挑選性去掉核酸，從而使胞內酶沉積出來。*鹽（濃度為0.5-1.0mg/mg蛋白質）對于挑選性沉積核酸的效果比錳離子還要好，酶不易失活。
在蛋白質純化進程中首要用到的膜別離技術多為超濾。在靜壓效果降低溶液經過孔徑十分小的濾膜，使溶液中分子量較小的溶質透過薄膜，而大分子被截留于膜表面。大多數超濾膜是由一層十分薄的功用膜與較厚的支持膜在一起而構成的。功用膜決定了膜的孔徑，而支持膜供給機械強度以反抗靜壓力。超濾濃縮的長處是：操作條件溫文，無相改變，對生物活性物質沒有損壞。
超濾體系首要由料液貯罐、泵、超濾器、透過液搜集罐構成，料液經泵打入超濾器，水及低分子量物質排出超濾器外，被濃縮的料液在料液貯罐、泵、及超濾器中循環(huán)。當料液濃縮至必定的倍數后即可作為進一步處理的濃縮料液。
ELISA試劑盒超濾應用于蛋白質類物質的濃縮和脫鹽進程中時應留意以下疑問：，在超濾循環(huán)進程中，因為泵和葉輪與料液的摩擦放熱效果，料液的溫度會逐步增加，會構成蛋白質分子的丟失。因此，料液貯罐應加冷卻體系，并裝置主動測溫及操控體系。第二，某些酶的輔助因子散失為疑問：一些酶富含輔助因子，其分子量小，超濾時易從透過液中排除去，因此在超濾前或超濾后要增加必定濃度的的輔助因子。
還可將超濾與親和層析相以進步別離純度。其工作原理是：當溶液中欲被別離的蛋白質不受阻止地經過超濾膜的孔隙時，如果在膜的一側著親和配基，該蛋白質就會與配基因此結聚在膜的這一側。不與配基的別的物質就將穿過孔而被帶走。再用適合的洗脫劑將該蛋白質洗脫下來，洗脫液用于進一步的別離純化。
蛋白質較易吸附與氣液界面，這有利于其構造的安穩(wěn)。泡沫別離進程是：蛋白質從主體溶液中擴散到氣液界面，該進程可能是可逆的也可能是不可逆的；分子發(fā)作重排，通常以為在空氣-水界面會構成兩種類型的膜，一種是稀膜，另一種是濃膜，可能會發(fā)作由多個分子集合在一起的景象。在氣液界面構成的蛋白質膜能夠是單層的也能夠是多層的。膜的類型取決于主體溶液及氣液界面上蛋白質的特性、構造和濃度。
ELISA試劑盒泡沫別離的意圖，一方面進步酶蛋白的富集率（泡沫中蛋白質的濃度/開始溶液中蛋白質濃度），另一方面進步酶蛋白的提取率（泡沫中蛋白質的提取率/開始的蛋白質質量），或使多組分混合物中某一組分的分配系數zui大。
