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閱讀:141發(fā)布時(shí)間:2017-11-15
ELISA試劑盒的處理樣本是保證ELISA檢查的性和性的*步,下面就簡略介紹一下不一樣類型的樣本的處理方法。
血清
血清是zui常用于ELISA檢查的一類樣本,處理也比較簡略。
將上清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免重復(fù)凍融。避免運(yùn)用溶血或高血脂的標(biāo)本。
常用的抗凝劑為EDTA、*和*等,檢查時(shí)還應(yīng)仔細(xì)閱覽試劑盒說明書,檢查試劑盒是不是對抗凝劑有特殊要求。
用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管搜集血液標(biāo)本,將試管或離心管室溫放置2小時(shí)或4℃放置一晚,使血清分出。
4℃ 1000×g離心20分鐘,仔細(xì)搜集上清。
一起也應(yīng)避免細(xì)菌污染,因?yàn)榫w內(nèi)可能富含內(nèi)源性的HRP然后致使檢查的假陽性。
一般我們可用于ELISA檢查的樣本是有多種類型的,如血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿液等,不一樣類型的檢查樣本前期的處理方法是不一樣的。
ELISA試劑盒血漿
用含抗凝劑的*或離心管搜集血液標(biāo)本,標(biāo)本搜集后30min內(nèi)4℃ 1000×g離心15min,取上清即血漿。
為了保證檢查的性,保存于-20℃或-80℃的樣本在1~6個(gè)月內(nèi)檢查;
4℃保存的樣本應(yīng)在1周內(nèi)進(jìn)行檢查。其他,還應(yīng)保證樣本不含NaN3,因?yàn)镹aN3會(huì)按捺HRP的活性,然后致使假陰性的效果。
細(xì)胞培養(yǎng)上清
取細(xì)胞培養(yǎng)上清到離心管,1000×g離心20min,除去細(xì)胞碎片及雜質(zhì),取上清,-20℃或-80℃保存,避免重復(fù)凍融。
尿液、唾液等其他液體生物樣本
1000×g離心20min,取上清即可檢查。
ELISA實(shí)驗(yàn)成功的條件是樣本的處理加上實(shí)驗(yàn)途中的操作,的處理樣本是保證ELISA檢查的性和性的*步。
總的來說,因?yàn)镋LISA只能檢查可溶性蛋白的含量,所以應(yīng)保證全部樣本均為澄清的液體,沉積或懸浮物都應(yīng)離心去掉。
主張將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免重復(fù)凍融。
ELISA試劑盒采血過程中應(yīng)避免溶血,因?yàn)榧t細(xì)胞裂解時(shí)會(huì)開釋具有過氧化酶活性的物質(zhì),在以HRP為符號(hào)的ELISA檢查中會(huì)有非特異性的顯色,而致使檢查的不性。
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