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閱讀:178發(fā)布時(shí)間:2017-5-24
ELISA試劑盒免疫共沉積(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性效果為根底的用于研討蛋白質(zhì)相互效果的經(jīng)典辦法。是斷定兩種蛋白質(zhì)在完好細(xì)胞內(nèi)性相互效果的有用辦法。 其原理是:當(dāng)細(xì)胞在非變性條件下被裂解時(shí),完好細(xì)胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間的相互效果被保留了下來。假如用蛋白質(zhì)X的抗體免疫沉積X,那么與X在體內(nèi)的蛋白質(zhì)Y也能沉積下來。這種辦法常用于測(cè)定兩種方針蛋白質(zhì)是否在體內(nèi);ELISA試劑盒也可用于斷定一種特定蛋白質(zhì)的新的效果伙伴。
ELISA試劑盒缺陷為:
1. 兩種蛋白質(zhì)的也許不是直接,而也許有第三者在中心起橋梁效果;
2. 也許檢查不到低親和力和剎那間的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互效果;
3. 必須在試驗(yàn)前猜測(cè)意圖蛋白是什么,以選擇zui終檢查的抗體,所以,若猜測(cè)不正確,試驗(yàn)就得不到成果,辦法本身具有冒險(xiǎn)性。
ELISA試劑盒長(zhǎng)處為:
1. 能夠分離得到天然狀況的相互效果蛋白復(fù)合物;
2. 相互效果的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的,處于天然狀況;
3. 蛋白的相互效果是在自然狀況下進(jìn)行的,能夠防止人為的影響。
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