上海一研生物科研有限公司
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更新時間:2017-04-10 13:23:37瀏覽次數(shù):96次
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中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。籆HO-HCV-C培養(yǎng)條件采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
細胞名稱 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-C培養(yǎng)條件
形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 CHO-HCV-C細胞整合有丙型肝炎病毒的Core基因,能穩(wěn)定表達C蛋白,是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國家重點實驗室郭佳博士于2008年構(gòu)建并保存。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C15
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-C培養(yǎng)條件冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。?;CHO-HCV-C培養(yǎng)條件操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
購買中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-C培養(yǎng)條件注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
皮氏假單胞菌 Pseudomonaspickettii 裂褶菌
Streptomycesalbidusvar.invertens 微白鏈霉菌轉(zhuǎn)化變種 瓜笄霉
杰丁畢赤酵母 Pichiajadinii 白腐盾殼霉
新月彎孢霉 Curvularialunata 白堊色鐮孢
Streptomycestsusimaensis 津島鏈霉菌 燕麥鐮孢
熒光假單胞桿菌 Pseudomonasfluorescens 禾谷鐮孢
Clostridiumsporogenes 生孢梭菌 乳酸鐮孢
藤黃微球菌 Micrococcusluteus 磚紅鐮孢
藤黃節(jié)桿菌 Arthrobacterluteus 雪腐鐮孢
禾谷鐮孢 直喙鐮孢
Gibberellaavenacea 燕麥鐮刀菌 黃瓜枯萎病
蕁麻青霉 Penicilliumurticae 北方梭囊孔菌
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